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文檔簡介
1、食源性致病菌快速檢測技術(shù)是解決食品安全問題的有效方法之一。由于近紅外光譜分析技術(shù)具有無損、高效、快速、方便和環(huán)保的特點(diǎn),因此被廣泛應(yīng)用到了食品安全檢測領(lǐng)域。本研究在前期對大腸桿菌研究成果的基礎(chǔ)上,以處于對數(shù)生長期的單增李斯特菌和沙門氏菌為研究對象,確定了近紅外光譜分析技術(shù)鑒別這兩種致病菌的樣品前處理的最佳參數(shù);利用基于主成分分析的投影判別法和聚類分析法,篩選出了鑒別食源性致病菌的近紅外光譜的最佳預(yù)處理方法;證明了三種食源性致病菌的細(xì)胞壁
2、、細(xì)胞質(zhì)和完整細(xì)胞分別對近紅外光有特異性吸收,并確定了食源性致病菌的近紅外鑒別方法。本研究的結(jié)果對闡明近紅外光譜分析技術(shù)快速檢測食源性致病菌的機(jī)制具有重要意義,為開發(fā)近紅外光譜分析技術(shù)檢測食品中致病菌的方法奠定了基礎(chǔ)。
本研究主要內(nèi)容包括:⑴利用比濁法繪制出單增李斯特菌和沙門氏菌的生長曲線,并確定了對數(shù)生長期,最后分別選定24h和16h為增菌培養(yǎng)時間。⑵以細(xì)胞破碎率為指標(biāo),通過單因素試驗(yàn)和正交試驗(yàn),確定了單增李斯特菌和沙門氏菌
3、的超聲細(xì)胞破碎的最佳參數(shù)組合。單增李斯特菌的最佳破碎參數(shù)組合為:超聲輸出功率600W、間隔時間5s、實(shí)際破碎總時間70min;沙門氏菌的最佳參數(shù)組合為:超聲輸出功率600W,間隔5s、實(shí)際破碎總時間60min。⑶以三種食源性致病菌的完整細(xì)胞樣品為研究對象,根據(jù)基于主成分分析的投影判別分析結(jié)果得出,利用第一主成分和第二主成分鑒別食源性致病菌是最佳方法。⑷以三種食源性致病菌的完整細(xì)胞樣品為研究對象,利用基于主成分分析的投影判別法分析時,光譜
4、數(shù)據(jù)經(jīng)過矢量歸一法和多元散射法處理后,分析結(jié)果最好,分辨率達(dá)到100%;采用Ward’s法進(jìn)行聚類分析時,原始光譜經(jīng)矢量歸一法處理后聚類結(jié)果比較理想,剔除異常樣品后,單增李斯特菌獨(dú)立分到第2類,大腸桿菌和沙門氏菌分到第3類,且兩種菌無混雜現(xiàn)象。利用近紅外光譜技術(shù)鑒別食源性致病菌時,主成分分析方法優(yōu)于聚類分析方法。⑸對三種食源性致病菌的近紅外模型識別方法的研究結(jié)果表明,不同細(xì)菌的細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)和完整細(xì)胞對近紅外光均有特異性吸收,可以利用近
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