金屬酞菁羧酸衍生物的合成及其在蛋白質分析中的應用.pdf

1、酞菁是一類在結構上與卟啉、葉綠素很相似的化合物。由于酞菁對光、熱的穩(wěn)定性好，在染料、顏料、光電材料、催化劑、光動力學療法、熒光分析等方面得到愈來愈廣泛的應用。本文在前人研究的基礎上，繼續(xù)開拓酞菁化合物在蛋白質分析中的應用。本論文共分三章。 第一章為緒論，首先綜述了酞菁化合物的結構、性質、合成和應用，著重介紹了它在生物分析中的應用；同時結合本文研究所涉及的領域，對蛋白質分析的研究現狀作了綜述，重點介紹了蛋白質光度分析法，如分光光度

2、法、熒光光度法、共振散射法等方法研究的現狀。然后提出了論文設想。 第二章以4-羧基鄰苯二甲酸酐為主要原料，鉬酸銨作催化劑，煤油作溶劑，在185～195℃條件下，液相法合成了三個具有代表性的四羧基金屬酞菁衍生物(CoC<,4>Pc、AlC<,4>Pc、MnC<,4>Pc)，并用紫外光譜、紅外光譜對其進行表征。 第三章運用共振散射法研究了三種四羧基金屬酞菁衍生物與蛋白質的相互作用： (1)根據蛋白質在弱酸性條件下對C

3、oC<,4>Pc散射信號的增強作用，建立了一種基于共振散射技術檢測蛋白質的新方法。實驗結果表明，在pH3.0的B-R緩沖溶液中，反應體系最大RLS位于332nm。在最佳實驗條件下，BSA、HSA、γ-IgG、EA的線性范圍分別是0.0-1.79μgmL<'-1>、0．0-1.50μg mL<'-1>、0-1.75μg mL<'-1>、0-2.0μg mL<'-1>，檢測限分別是17.72ng mL<'-1>，16.02ngmL<'-1>

4、，16．84 ng mL<'-1>、19.20ng mL<'-1>。該方法用于人血清樣品中總蛋白的檢測，分析結果與臨床數據相吻合。 (2)在pH3.5的Britton-Robinson緩沖介質中，適量蛋白質能增強AlC<,4>Pc的共振散射信號，最大RLS位于388nm處，由此建立了共振散射法測定蛋白質的方法。BSA、HSA、γ-IgG、EA、TPHS線性范圍分別為0-1.75μg mL<'-1>、0-1.50μg mL<'-1

5、>、0-2.00μg mL<'-1>、0-2.50μg mL<'-1>、0-1.63μg mL<'-1>，檢測限分別為15.71 ng mL<'-1>、15.79 ng mL<'-1>、16.61 ng mL<'-1>、14.80 ng mL<'-1>、17.89 ng mL<'-1>，用TPHS為標準檢測人血清樣品中總蛋白，檢測結果與雙縮脲法結果相符。 (3)在pH3.0的Britton-Robinson緩沖介質中，適量的蛋白

6、質能夠增強MnC<,4>Pc的共振散射信號，反應體系最大RLS位于385nm處，且增強的散射信號與蛋白質的濃度在一定范圍內呈正比。據此建立了MnC<,4>Pc共振散射法檢測微量蛋白質的新方法。在最佳條件下，測定BSA、HSA、γ-IgG、EA的線性范圍分別是0-2.0μg mL<'-1>、0-2.0μg mL<'-1>、0-1.75μg mL<'-1>、0-1.75μg mL<'-1>，檢測限分別是16.37 ng mL<'-1>、17