CUTL1在肝細胞癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、實驗目的：
　　肝細胞癌（hepatic cell cancer，簡稱HCC），是我國乃至世界常見惡性腫瘤之一，其死亡率在全世界惡性腫瘤中排名第三位，且其發(fā)病率還在逐漸上升。隨著預防、診斷、治療等技術的不斷進步，對HCC的處理水平逐漸提高，據調查顯示，在1992年-2004年間，HCC的2-4年生存率提高了兩倍。然而，總體上，HCC一年生存率仍然低于50％。
　　隨著人類對疾病的研究進入分子水平，人們發(fā)現許多疾病的發(fā)生存在細

2、胞分子上的變化。轉錄因子CUTL1，又被稱為CDP、cut、Cux等，均為CCAAT置換蛋白，屬于同源結構域轉錄因子家族，在進化上高度保守。經研究表明，CUTL1在調節(jié)細胞分化、增殖及細胞周期進展等生物學過程中發(fā)揮了重要作用，且相關研究表明，CUTL1參與了結腸癌、乳腺癌、子宮肌瘤、胰腺癌等惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。本文基于此，初步研究了CUTL1的表達在肝癌及癌旁中是否有差異性，并對大樣本肝癌資料進行分析，研究了CUTL1的表達與肝癌的臨床

3、病理因素及預后的關系，探討了CUTL1對肝癌患者生存期的影響。
　　實驗方法：
　　1、收集2013年2月至2013年7月在中南大學湘雅醫(yī)院手術切除的36例原發(fā)性肝細胞癌癌組織及其配對的癌旁組織，組織收取后立即放入液氮罐中，并隨后轉入-80℃冰箱冷凍保存。取新鮮冰凍組織行Western-blot及實時熒光定量PCR實驗，檢測兩種組織中CUTL1在mRNA及蛋白水平上的量的表達情況，并分析了mRNA及蛋白表達間的相關性。并將癌

4、組織中CUTL1蛋白量與HCC患者臨床病理資料相聯系，分析它們的相關性;
　　2、收集了中南大學湘雅醫(yī)院2007年1月至2008年1月部分肝癌患者手術切除石蠟標本136例，全部病例均經病理檢查證實為肝細胞癌，并在入組前進行了病理復查。對該136例標本中的CUTL1分子進行免疫組織化學檢查，研究CUTL1蛋白在肝癌中的表達情況，并分析了CUTL1蛋白表達與肝癌臨床病理因素關系，最后研究了CUTL1陽性表達對肝癌患者無瘤生存期及總生存

5、期的影響及對肝癌患者預后的風險性的評估。
　　實驗結果：
　　1、Western-blot及RT-PCR結果顯示，肝癌組織中CUTL1的蛋白及mRNA表達水平明顯高于癌旁組織(P＜0.05)，相關性分析顯示mRNA的表達與蛋白表達之間呈正相關。癌組織中CUTL1蛋白表達量與臨床病理資料相聯系發(fā)現，CUTL1的表達在腫瘤多發(fā)、腫瘤直徑大、有血管侵犯及高的Edmondson分級患者中明顯高于腫瘤單發(fā)、瘤體直徑小、無血管侵犯及低的

6、Edmondson分級的患者(P＜0.05);
　　2、免疫組化分析顯示，CUTL1蛋白表達主要存在于細胞核中。肝癌組織中的CUTL1蛋白表達量與肝癌的臨床病理指標的相關性分析示其水平與腫瘤直徑、血管侵犯及Edmondson分級明顯正相關(P＜0.05)。而與患者的年齡、性別、肝硬化與否、腫瘤數目及AFP無明顯相關(P＞0.05);
　　3、生存分析顯示CUTL1高表達肝癌患者無瘤生存期及總生存期明顯縮短(P＜0.05)，C

7、UTL1的表達與肝癌患者的預后呈負相關。Cox風險比例分析發(fā)現CUTL1對肝細胞肝癌患者總生存期有影響，是獨立的風險因素(P＜0.05)。
　　結論：
　　1、在肝細胞癌組織中，CUTL1mRNA及蛋白表達明顯增加，提示CUTL1可能為一種癌基因，促進了HCC的發(fā)生發(fā)展。
　　2、進一步進行統(tǒng)計學分析發(fā)現，CUTL1的表達在腫瘤多發(fā)、腫瘤直徑大、有血管侵犯及高的Edmondson分級患者中明顯增高，提示CUTL1可能有