熱療輔助的腫瘤基因治療研究.pdf

1、基因治療是將限定的遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)入患者特定靶細(xì)胞，以最終達(dá)到預(yù)防或改變特殊疾病狀態(tài)為目的的治療方法，其關(guān)鍵問(wèn)題是基因的輸送和基因進(jìn)入細(xì)胞后的表達(dá)調(diào)控。基于HSP啟動(dòng)子的熱誘導(dǎo)基因表達(dá)系統(tǒng)具有較低的本底以及時(shí)間和空間調(diào)控表達(dá)的性質(zhì)，是腫瘤基因治療中外源基因表達(dá)調(diào)控的理想選擇之一。而另一方面，聚焦超聲加熱技術(shù)（HIFU）的發(fā)展使得對(duì)于特定組織的加熱可以更好的達(dá)到預(yù)定溫度分布和精度，在對(duì)于腫瘤熱療的基礎(chǔ)上，還可以調(diào)控基因表達(dá)。在本論文工作中，我們

2、探索了應(yīng)用HIFU技術(shù)進(jìn)行熱療輔助腫瘤基因治療的方法。 我們首先克隆了hTNFα基因，得到含HSP70B啟動(dòng)子的熱誘導(dǎo)質(zhì)粒pD3SX-hTNFα，以及作為對(duì)照的普通表達(dá)質(zhì)粒gWIZ-hTNFα。并應(yīng)用HIFU技術(shù)，通過(guò)對(duì)特定組織的加熱，啟動(dòng)HSP70B啟動(dòng)子下游的外源基因表達(dá)，考察了基因表達(dá)與HIFU參數(shù)、加熱溫度，時(shí)間等關(guān)系，尋找最優(yōu)表達(dá)條件，以及重復(fù)啟動(dòng)的可能性。 進(jìn)而，我們以C57小鼠移植的Lewis肺癌為模型，首

3、次研究了HIFU熱療、局部表達(dá)TNFα的免疫基因治療、以及兩者結(jié)合的治療效果。通過(guò)組織切片、細(xì)胞凋亡、外源基因表達(dá)等檢查手段，以及腫瘤生長(zhǎng)曲線的觀察，初步表明了熱療與免疫基因治療的良好協(xié)同作用。 本論文的研究結(jié)果，提示了針對(duì)腫瘤組織的熱療與基因治療聯(lián)合作用的可能性，探索了一條新的腫瘤治療道路。我們期望，通過(guò)進(jìn)一步優(yōu)化腫瘤特異性的基因?qū)牒捅磉_(dá)調(diào)控體系，以及HIFU加熱調(diào)控的方法，能夠?qū)崿F(xiàn)三維精確定位的針對(duì)腫瘤的治療，成為有效的新