PTEN在七氟烷后處理激活大鼠腦缺血再灌注時PI3K-Akt信號通路中的作用.pdf

1、本研究采用線栓法建立大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷（MCAO）模型，通過Longa5分制神經功能缺損評分法（NDS）、紅四氮唑(TTC)染色及腦梗死面積的測定、原位細胞凋亡檢測法（TUNEL法）判斷七氟烷后處理是否具有保護腦缺血再灌注損傷作用，并通過Western Blot技術檢測缺血再灌注腦組織中PTEN、Akt的表達及磷酸化的改變來闡述七氟烷后處理腦保護作用的可能機制。
　　一、七氟烷后處理減輕大鼠局灶性腦缺血再灌注損傷
　

2、　采用MCAO模型，在再灌注即刻給予不同濃度（分別為0.5MAC、1.0MAC和1.5MAC）七氟烷后處理30min，通過Longa5分制NDS法、TTC染色及腦梗死體積的測定和TUNEL凋亡檢測判斷七氟烷后處理是否具有保護腦缺血再灌注損傷作用。結果顯示1.0 MAC與1.5 MAC七氟烷后處理能夠明顯保護再灌注腦組織，而0.5MAC后處理腦保護作用不明顯。
　　二、大鼠腦缺血再灌注損傷誘導的PTEN、Akt的表達及磷酸化的改變<

3、br>　　采用MCAO模型，通過Western Blot技術檢測大鼠腦缺血90min，再灌注后0min、30min、3 h、6 h、12 h、24 h及72 h腦缺血半影區(qū)中P TEN、Akt的表達及磷酸化的改變。結果顯示 p-Akt表達水平在腦缺血再灌注后30 min開始升高，再灌注3 h達到最高峰，持續(xù)至再灌注12h，隨后逐漸下降，至再灌注24 h恢復至假手術組水平，持續(xù)至72 h；p-PTEN表達水平在腦缺血再灌注即刻開始升高，再

4、灌注12h達到最高峰，隨后逐漸下降，至再灌注24h恢復至假手術組水平，持續(xù)至72 h。缺血再灌注誘導的p-Akt及p-PTEN表達變化，表明Akt、PTEN參與了大鼠腦缺血再灌注損傷。
　　三、PTEN在七氟烷后處理激活大鼠腦缺血再灌注時PI3K/Akt信號通路中的作用
　　采用MCAO模型，缺血前腹腔注射pic（PTEN抑制劑），再灌注即刻給予七氟烷后處理，采用NDS評分、TTC染色梗死體積計算及TUN EL陽性細胞百分比