miR-141對(duì)卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞COC1-DDP生長(zhǎng)、凋亡等生物學(xué)活性的影響.pdf

1、目的：
　　研究miR-141對(duì)卵巢癌順鉑耐藥株COC1/DDP細(xì)胞生長(zhǎng)，凋亡等生物學(xué)活性的影響。
　　方法：
　　1、針對(duì)miRNA-141設(shè)計(jì)相應(yīng)的反義寡核苷酸(ASO-141)構(gòu)建載體，向卵巢癌順鉑耐藥細(xì)胞COC1/DDP中轉(zhuǎn)染ASO-141，應(yīng)用流式細(xì)胞儀驗(yàn)證細(xì)胞轉(zhuǎn)染率。
　　2、收集轉(zhuǎn)染前后的細(xì)胞，分實(shí)驗(yàn)組、陰性對(duì)照組、脂質(zhì)體對(duì)照組及空白對(duì)照組，MTT法檢測(cè)各組細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率;流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞凋亡

2、率;Real-timePCR檢測(cè)各組細(xì)胞中miR-141表達(dá);Western-Blot檢測(cè)各組細(xì)胞中PTEN蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1、驗(yàn)證ASO-141轉(zhuǎn)染COC1/DDP細(xì)胞成功，經(jīng)流式細(xì)胞儀驗(yàn)證轉(zhuǎn)染率約60％。
　　2、MTT結(jié)果顯示:對(duì)照組之間細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率差異不顯著(P＞0.05);轉(zhuǎn)染ASO-141實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率較對(duì)照組增高(P＜0.05);隨著轉(zhuǎn)染ASO-141濃度的增加，細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率也隨之增

3、加，說(shuō)明具有濃度依賴(lài)性。
　　3、流式細(xì)胞技術(shù)結(jié)果顯示:對(duì)照組之間細(xì)胞凋亡率差異不顯著(P＞0.05);轉(zhuǎn)染ASO-141實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞凋亡率較對(duì)照組明顯增高(P＜0.05)。
　　4、Real-timePCR結(jié)果顯示:miR-141在實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中較對(duì)照組細(xì)胞中表達(dá)低(P＜0.05)。
　　5、Western-Blot結(jié)果顯示:PTEN蛋白在實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞中較對(duì)照組細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)(P＜0.05)。
　　結(jié)論：