生物還原響應(yīng)的葡聚糖修飾的線性聚乙烯亞胺基因釋放載體的研究.pdf

1、納米基因載體可有效提高基因的生物活動(dòng)率以及增強(qiáng)藥效，是目前基因治療研究的重要研究方向之一。利用納米載體遞送治療基因有許多優(yōu)勢:1）較好地增強(qiáng)基因在體內(nèi)的穩(wěn)定性;2）延長其在體內(nèi)的循環(huán)時(shí)間;3）增強(qiáng)基因藥物對(duì)腫瘤的靶向性;4）降低毒副作用;5）提高生物利用率。目前，納米膠束、脂質(zhì)體、固體納米粒和納米泡囊因其可控的物理化學(xué)屬性，均可作為具有控制釋放基因的納米載體，并具有良好的臨床應(yīng)用潛力。
　　這篇論文的目的是設(shè)計(jì)一個(gè)結(jié)構(gòu)明確的帶有正

2、電荷的葡聚糖，其可靜脈基因遞送到腫瘤并能夠進(jìn)行體內(nèi)轉(zhuǎn)染。此聚合物是通過二硫鍵連接的葡聚糖和線性聚乙烯亞胺的偶聯(lián)物(Dex-SS-LPEI)，其為非病毒載體，可靜脈內(nèi)基因遞送到Balb/c荷瘤裸鼠體內(nèi)。通過具有吡啶環(huán)端基的LPEI(2kDa或5kDa)與巰基化葡聚糖(5kDa或10kDa)偶合，成功制備了以葡聚糖作為主鏈、LPEI作為側(cè)鏈的聚合物Dex-SS-LPEI。該聚合物能與基因成功鍵合，并具有納米尺寸和中等表面電荷。此外，與沒有進(jìn)

3、行葡聚糖修飾的22kDa的LPEI相比，該聚合物在生理?xiàng)l件下具有相當(dāng)好的膠體穩(wěn)定性，并且在細(xì)胞內(nèi)的還原環(huán)境中可以通過二硫鍵斷裂釋放基因。體外轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)表明Dex-SS-LPEI在不同細(xì)胞中都能夠進(jìn)行有效的基因轉(zhuǎn)染。并發(fā)現(xiàn)5kDa葡聚糖與5kDaLPEI的偶聯(lián)物(Dex5k-SS-LPEI5k)具有最好的轉(zhuǎn)染效率。此外，Dex-SS-LPEI偶聯(lián)物通過尾靜脈注射可在Balb/c腫瘤裸鼠內(nèi)進(jìn)行全身基因遞送，和22kDa的LPEI的陽性對(duì)照組相

4、比，其在HepG2或SKOV-3腫瘤具有更高的轉(zhuǎn)基因表達(dá)。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與22kDa的LPEI相比，10kDa葡聚糖與5kDaLPEI的偶聯(lián)物(Dex10k-S S-LPEI5k)在腫瘤內(nèi)具有較高的基因表達(dá)但在肺中具有的較低的基因表達(dá)。這項(xiàng)研究的結(jié)果表明，在對(duì)Dex-SS-PEI偶聯(lián)物的性能改善和在荷瘤裸鼠內(nèi)的基因表達(dá)中葡聚糖起著關(guān)鍵的作用。在體內(nèi)Dex-SS-LPEI的細(xì)胞毒性低，并且給小鼠注射后小鼠可以成功存活。該研究表明此聚合物