RNA干擾HIF-1α影響宮頸癌HeLa細胞上皮細胞—間質(zhì)變的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：通過RNA干擾技術沉默人宮頸癌HeLa細胞乏氧誘導因子-1α(hypoxia inducible factor-1α，HIF-1α)的表達，在細胞水平研究HIF-1α對宮頸癌HeLa細胞上皮細胞－間質(zhì)變標記蛋白(E-cadherin、N-cadherin、vimentin)表達的影響。
　　 方法：將人宮頸癌HeLa細胞株(記為H0細胞)、轉(zhuǎn)染pGenesil-1空白質(zhì)粒的HeLa細胞株(記為H1細胞)及轉(zhuǎn)染HIF-1α-

2、shRNA質(zhì)粒的HeLa細胞株(記為H2細胞)分別行常氧及乏氧(150μmol/LCoCl2培養(yǎng)12小時)培養(yǎng)，應用Western blotting、免疫組織化學法檢測每組HeLa細胞中HIF-1α、上皮標記蛋白E-cadherin、間質(zhì)標記蛋白vimentin、N-cadherin的表達情況。組間比較采用方差齊性分析及t檢驗，以P<0.05為有統(tǒng)計學差異。
　　 結(jié)果：1、Western blotting分析顯示，H0細胞乏氧

3、組HIF-1α、E-cadherin、vimentin及N-cadherin的平均光密度分別為1.182±0.251、0.409±0.112、3.187±0.523、1.638±0.417；H1細胞乏氧組HIF-1α、E-cadherin、vimentin及N-cadherin的平均光密度分別為1.364±0.279、0.441±0.126、3.276.±0.601、1.437±0.279；H2細胞乏氧組HIF-1α、E-cadheri

4、n、vimentin及N-cadherin的平均光密度分別為0.248±0.053、0.833±0.257、0.992±0.270、1.004±0.236。2、免疫組織化學顯示H0細胞、H1細胞在乏氧時HIF-1α、N-cadherin、vimentin蛋白高表達，而E-cadherin低表達，H2細胞在乏氧時HIF-1α、N-cadherin、vimentin蛋白表達顯著減弱，而E-cadherin高表達。3、H2細胞乏氧組與H0細胞

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