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文檔簡介
1、目的:
課題組前期利用中國人膀胱癌細胞系 BIU-87篩選出了中國人小分子多肽CSSPIGRHC,該實驗要鑒定此多肽對中國人膀胱癌細胞系BIU-87的結合是否具有特異性以及結合力的強弱。
方法:
培養(yǎng)4種癌細胞:中國人膀胱癌細胞系BIU-87、人肝癌細胞系SMMC-7721、人乳腺癌系MCF-7、人宮頸癌細胞系SiHa,分別結合熒光小分子多肽(熒光探針)FITC-CSSPIGRHC,在激光共聚焦顯微鏡下觀察
2、和流式細胞儀中檢測。
結果:
1.本實驗成功培養(yǎng)了中國人膀胱癌細胞系BIU-87、人肝癌細胞系SMMC-7721、人乳腺癌系 MCF-7、人宮頸癌細胞系 SiHa,各個細胞系生長良好,達到了實驗要求。
2.激光掃描共聚焦顯微鏡(CLSM)觀察顯示:
2.1熒光探針 FITC-CSSPIGRHC能與中國人膀胱癌BIU-87細胞、人肝癌SMMC-7721細胞、人乳腺癌MCF-7細胞和人子宮頸癌SiHa
3、細胞結合(呈綠色)。
2.2熒光探針FITC-CSSPIGRHC與中國人膀胱癌BIU-87細胞結合的平均熒光值強于人肝癌SMMC-7721細胞、人乳腺癌MCF-7細胞和人子宮頸癌SiHa細胞,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
3.流式細胞儀(FCM)檢測顯示:
3.1熒光探針FITC-CSSPIGRHC能與中國人膀胱癌BIU-87細胞、人肝癌SMMC-7721細胞、人乳腺癌MCF-7細胞和人子宮頸癌SiH
4、a細胞結合(平均熒光強度值高于空白組)。
3.2熒光探針FITC-CSSPIGRHC與中國人膀胱癌BIU-87細胞結合的平均熒光強度值高于人肝癌SMMC-7721細胞、人乳腺癌MCF-7細胞和人子宮頸癌SiHa細胞,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
4.統(tǒng)計分析結果顯示:導向肽CSSPIGRHC既能和中國人膀胱癌細胞系BIU-87能夠結合,且很強,也能和其它3種癌細胞結合,但是前者明顯比后3種結合力強,差異有統(tǒng)計學
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