(-)-棉酚對滑膜肉瘤細(xì)胞增殖與凋亡的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、目的：探討（－）-棉酚對人滑膜肉瘤SW-982細(xì)胞體外增殖和凋亡的影響及其可能的作用機(jī)制。方法:M TT法檢測（－）-棉酚對SW-982細(xì)胞的增殖抑制作用；Wright-Giemsa染色、Hoechst33258熒光染色及透射電鏡觀察（－）-棉酚作用后SW-982細(xì)胞形態(tài)的變化；流式細(xì)胞儀觀察（－）-棉酚對細(xì)胞周期的調(diào)控作用和細(xì)胞凋亡率的影響；Western blot方法分析（－）-棉酚對細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2，Bax表達(dá)水平的影響

2、；比色法研究（－）-棉酚對Caspase-9和Caspase-3活性的影響。結(jié)果：（－）-棉酚對人滑膜肉瘤株SW-982具有生長增殖抑制作用，并且這種作用呈時(shí)間、劑量依賴效應(yīng)。隨著（－）-棉酚濃度的增加和作用時(shí)間的延長，其對細(xì)胞增殖的抑制作用明顯增強(qiáng)。Wright-Giemsa染色光學(xué)顯微鏡下、Hoechst33258染色熒光顯微鏡下及透射電鏡鏡下均可見經(jīng)4.0μmol/L的（－）-棉酚作用24h后SW-982細(xì)胞出現(xiàn)凋亡的特征性形態(tài)學(xué)

3、改變。經(jīng)（－）-棉酚作用24h后，隨著濃度的增加，SW-982細(xì)胞中G0/G1期細(xì)胞數(shù)比例增加，而G2/M期、S期細(xì)胞數(shù)比例均有不同程度減少，細(xì)胞被阻滯于G0/G1期，表明（－）-棉酚對SW-982細(xì)胞具有細(xì)胞周期調(diào)控作用，Annexin V/PI雙染法流式細(xì)胞儀測得細(xì)胞早期凋亡率也同（－）-棉酚濃度呈正相關(guān)關(guān)系。經(jīng)（－）-棉酚作用24h后， SW-982細(xì)胞中的凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2的表達(dá)與（－）-棉酚濃度呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，而Bax蛋白的

4、表達(dá)與（－）-棉酚濃度呈正相關(guān)關(guān)系。4.0μmol/L的（－）-棉酚作用不同時(shí)間后出現(xiàn)了Caspase-9、Caspase-3活性的變化。作用12h時(shí)，Caspase-9活性達(dá)到高峰，隨后活性呈下降趨勢，作用18h時(shí)Caspase-3活性達(dá)到高峰，隨后活性呈下降趨勢。結(jié)論：本研究證實(shí)（－）-棉酚對人滑膜肉瘤株SW-982具有抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用，其作用機(jī)制可能與Bcl-2蛋白表達(dá)水平下調(diào)，Bax蛋白表達(dá)水平上調(diào)，Caspase-9、