滇雞血藤的化學成分及復方雞血藤制劑的制備工藝與質量標準研究.pdf

1、復方雞血藤膏為傳統中藥,收載于《中國藥典》(2005版一部),由滇雞血藤膏粉、川牛膝、續(xù)斷、紅花、黑豆等加工而成,功能補血、活血、調經,用于血虛、手足麻木、關節(jié)酸痛和月經不調。該制劑療效確切、歷史悠久,但由于基礎研究薄弱,劑型落后,缺乏特征性的定性定量指標。本課題關鍵目的是研究制定可控性強的復方雞血藤制劑的質量標準,為此首先需要對滇雞血藤進行化學成分研究,闡明主要藥效物質基礎,并改革復方雞血藤膏傳統工藝,制備量小、方便的新制劑。

2、　　 滇雞血藤膏粉為滇雞血藤的水提干浸膏粉,為方中君藥,功效明顯、劑量大,是復方雞血藤制劑質量控制研究的重點。滇雞血藤主要來源于五味子科南五味子屬內南五味子(Kadsura interior A.C.Smith)和異型南五味子(K.heteroclita(Roxb.)Craib.)的藤莖。我們對滇雞血藤化學成分進行研究,采用硅膠柱色譜、HPLC制備色譜以及紅外、紫外、旋光譜、質譜、核磁共振(氫譜、碳譜、HMQC、HMBC和NOESY)

3、等波譜技術從滇雞血藤乙酸乙酯部位分離鑒定了17個木脂素、2個三萜(甘五酸、馬五味子酸)和β-谷甾醇。木脂素類化合物包括聯苯環(huán)辛烯類木脂素10個:南五味子酯甲、南五昧子酯乙、滇南五味子酮、南五味子素、異型南五味子丙素、內南五味子酯丙、五脂酮A、binankadsurin A、angeloylbinankadsurin A、戈米辛U；螺苯駢呋喃型聯苯環(huán)辛烯類木脂素6個:南五味子酯丙、滇南五味子酯、異型南五味子丁素、內南五味子素、schiar

4、isanrin C、異型南五味子庚素；2,3-二甲基-1,4二芳基丁烷類木脂素1個:內消旋二氫愈創(chuàng)木脂酸。其中南五味子酯甲、乙、丙和滇南五味子酯為新化合物,滇南五味子酮為首次從自然界中分離得到；南五味子酯丙為首個C-2位無氧取代的聯苯環(huán)辛烯類木脂素；異型南五味子丁素含量高,具有抗氧化、抗病毒活性,且能明顯抑制KCl、CaCl2和NA產生的血管收縮以及ADP和PAF誘導的兔血小板聚集,可作為復方雞血藤膏質量控制的指標成分。
　　

5、復方雞血藤膏工藝改革同時以有效成分含量和藥效為考察指標。建立了變色酸鈉-濃硫酸比色法測定總木脂素的含量,以小鼠腸系膜微循環(huán)實驗進行藥效學研究。比較發(fā)現,滇雞血藤醇提浸膏粉的總木脂素含量和促微循環(huán)作用都明顯高于水提滇雞血藤膏粉,說明總木脂素含量的高低可反映藥效強弱,因而滇雞血藤采用乙醇提取較為合理。采用正交設計優(yōu)選出滇雞血藤的最佳提取方案為:80％乙醇冷浸24小時,以每3小時1倍體積的流速滲漉,共收集滲漉液40倍體積。滇雞血藤膏粉(醇提)

6、新的處方劑量通過滇雞血藤醇、水提取物的量效關系考察確定為原水提滇雞血藤膏粉的1/4。新處方制備成復方雞血藤膠囊后,每次服藥劑量由10g降至1.2g(4粒)。另外,單純改變傳統劑型,制備了復方雞血藤顆粒劑。新制劑克服了復方雞血藤膏劑量大、服用不方便的缺點。
　　 質量標準研究重點建立指標成分的含量測定方法。通過優(yōu)化色譜條件,建立了滇雞血藤藥材、滇雞血藤膏粉、復方雞血藤顆粒、復方雞血藤膠囊及其中間體中異型南五味子庚素、戈米辛A、內南

7、五味子素、內南五味子乙素、異型南五味子丁素、南五味子素、五味子甲素和五味子丙素8個木脂素的HPLC-DAD含量測定方法,并進行了方法學考察。結果表明采用HPLC方法測定以上五個樣品中的木脂素含量可行,滇雞血藤醇提浸膏粉、復方雞血藤膠囊及其中間體中8個木脂素成分均可準確定量；復方雞血藤顆粒和滇雞血藤藥材中除五味子甲素外7個木脂素可準確定量。三批樣品測定結果表明,異型南五味子丁素、南五味子素、內南五味子素3個木脂素在滇雞血藤及其復方制劑中含

8、量普遍較高,批次間無明顯差異；其中異型南五味子丁素含量最高,活性較強,其抑制血管收縮和血小板聚集的作用體現了復方制劑的活血功效,被確定為復方雞血藤制劑含量測定的指標成分。根據三批樣品的測定結果建議復方雞血藤膠囊每粒含丁素含量不得少于0.35mg；復方雞血藤顆粒丁素含量不得少于8.2μg/g。另外,建立了復方雞血藤制劑中滇雞血藤、川牛膝和續(xù)斷的TLC定性鑒別方法,特征明顯。
　　 本文明確了滇雞血藤主要藥效物質基礎和指標成分,為復