人參皂苷Rb1干預術后疲勞綜合征大鼠蛋白質(zhì)代謝的研究.pdf

1、目的：
　　1.研究術后疲勞綜合征(Postoperative Fatigue Syndrome，POFS)大鼠模型AMPK信號通路影響蛋白質(zhì)代謝相關分子變化規(guī)律。
　　2.觀察在應用人參皂苷Rb1(Ginsenoside Rb1)干預后，AMPK信號通路上影響蛋白質(zhì)代謝相關分子變化特點。
　　方法：
　　1.實驗動物 SPF級SD雄性青年大鼠，體重(200-300g)，北京維通利華實驗動物有限公司（SCXK（京

2、）2006-0009)。
　　2.方法和檢測指標將雄性SD大鼠，稱重標號隨機分為假手術對照組（C組），POFS模型組（M組）和人參皂苷Rb1干預組（R組）。每組再按時間點分為術后1、3、5、7天組，C組和M組大鼠分別在術前3天分別到取材當天，每天腹腔注射1次4ml/kg體重的生理鹽水，R組大鼠在相同條件下腹腔注射4ml/kg體重的人參皂苷Rb1，人參皂苷Rb1用生理鹽水配置成3.75g/L的溶液現(xiàn)配現(xiàn)用。通過Real-time P

3、CR檢測術后第1、3天組大鼠肝臟組織和骨骼肌AMPK信號通路中ACC1，ACC2，F(xiàn)OXO1，MURF1，EEF2，p70s6k mRNA表達量的變化。通過Western Blot檢測術后1、3、5、7天組ACC，F(xiàn)OXO1，MURF1，EEF2，p70s6k蛋白表達。
　　采用Spss19統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，實驗數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（z±s）表示，多組間比較采用單因素方差分析(One-Way ANOVA)，P＜0.05是認為差異

4、有統(tǒng)計學意義。
　　結果:
　　1.MURF1 mRNA表達量變化
　　與C組比，M組骨骼肌MURF mRNA表達量升高(1d、3d，P＜0.05); R組與M組比，注射人參皂苷Rb1后骨骼肌MURF mRNA表達量降低(1d、3d，P＜0.05)，而肝組織中則無上述變化。如圖1.1，1.2。
　　2.FOXO1 mRNA表達量變化
　　與C組比，M組骨骼肌FOXO1 mRNA表達量升高(1d、3d，P＜0

5、.05);R組與M組比，注射人參皂苷Rb1后骨骼肌FOXO1 mRNA表達量降低(1d、3d，P＜0.05)，而肝組織中則無上述變化。如圖1.3，1.4。
　　3.EEF2、p70S6KmRNA表達量變化
　　3.1 骨骼肌中:EEF2、p70S6K mRNA相對表達量M組相對于C組升高(1d、3d，P＜0.0.5)，應用人參皂苷Rb1干預后R組相對于M組降低(1d，3d，P＜0.0.5)。如圖1.5，1.6，1.7，1.8

6、。
　　3.2 肝臟中:EEF2、p70S6KmRNA相對表達量M組相對于C組升高(1d、3d，P＜0.0.5)，應用人參皂苷Rb1干預后R組相對于M組降低(1d、3d，P＜0.0.5)。如圖2.1，2.2，2.3，2.4。
　　4.ACC1、ACC2 mRNA表達量變化
　　4.1 在骨骼肌中:ACC1、ACC2 mRNA相對表達量M組相對于C組增加(1d，P＜0.0.5)，R組相對于M組降低(1d，P＜0.0.5)

7、。如圖1.9，1.10。
　　4.2 在肝臟中:ACC1、ACC2 mRNA相對表達量，M組相對于C組升高(1d，P＜0.0.5)，應用人參皂苷Rb1干預后R組相對于M組升高(1d，P＜0.0.5);ACC1、ACC2 mRNA相對表達量M組相對于C組降低(3d，P＜0.0.5)，應用人參皂苷Rb1干預后R組相對于M組降低(3d，P＜0.0.5)。如圖2.5,2.6,2.7,2.8。
　　5.Western blotting

8、結果
　　結果顯示ACC蛋白表達量隨時間(1d、3d、5d、7d)延長而增加。相對于C組，M組大鼠骨骼肌ACC蛋白表達在術后明顯升高，相對于M組，R組蛋白表達下降。而ACC/P-ACC蛋白表達量，M組最高，R組少于M組。FOXO1蛋白表達量隨時間(1d、3d、5d、7d)延長而增加，而P-FOXO1蛋白表達量隨時間(1d、3d、5d、7d)延長而減少。C組、M組、R組FOXO1蛋白表達量，M組最高，R組少于M組。如圖3.2。EEF

9、2、p70S6K蛋白表達量。C組、M組、R組EEF2、p70S6K蛋白表達量，M組高于C組，R組未見明顯差別(1d、3d、5d、7d)。如圖3.3。
　　結論:
　　1.術后疲勞綜合征大鼠相關分子的表達相對于假手術對照組表達有一定規(guī)律，骨骼肌通過MURF1、FOXO1、EEF2、p70S6K、ACC1、ACC2表達量變化，抑制蛋白質(zhì)的合成和促進降解，減少能量消耗。肝臟通過EEF2、p70S6K、、ACC1、ACC2表達量變化