甘草酸二銨對腦死亡狀態(tài)下大鼠肝臟影響的實驗研究.pdf

1、第一章：大鼠腦死亡模型的建立及相關(guān)實驗研究
　　 目的:應用顱內(nèi)高壓法建立大鼠腦死亡模型來復制臨床腦死亡狀態(tài)，并將爆發(fā)式和漸進式顱內(nèi)高壓腦死亡模型進行比較，為研究腦死亡提供穩(wěn)定、簡便、可重復和可控制的建模方式。
　　 方法:SD大鼠30只，隨機分為對照組(A組)10只、爆發(fā)式腦死亡組(B組)10只和漸進式腦死亡組(C組)10只，A組在麻醉后行動脈插管、氣管插管及顱骨鉆孔置管，但不行顱內(nèi)加壓。B組麻醉后行動脈插管、氣管插管

2、及顱骨鉆孔置管，后行顱內(nèi)球囊以16μl/min的速度加壓。C組麻醉后行動脈插管、氣管插管及顱骨鉆孔置管，后行顱內(nèi)球囊以4μl/min的速度加壓，在呼吸機維持下，生物機能實驗系統(tǒng)監(jiān)測大鼠腦死亡狀態(tài)6 h，實驗過程中監(jiān)測動脈壓及心率的變化，并比較建模手術(shù)成功率。
　　 結(jié)果:腦死亡組建立了顱內(nèi)高壓腦死亡模型，并誘導成功16只，誘導后期動脈壓及心率驟然升高，后逐漸下降，其中B組急劇下降，幅度明顯，且有3只因動脈壓過低剔除研究，而C組下

3、降幅度緩慢；與A組比較，腦死亡組谷值和峰值時動脈壓及心率的差異均具有統(tǒng)計學意義，手術(shù)成功率B組70％(7/10)小于C組90％(9/10)。
　　 結(jié)論:應用顱內(nèi)高壓法能成功建立穩(wěn)定可靠的大鼠腦死亡模型，其中漸進式顱內(nèi)高壓腦死亡模型有更高的手術(shù)成功率。
　　 第二章：腦死亡狀態(tài)對大鼠肝臟損傷的實驗研究
　　 目的:建立大鼠顱內(nèi)高壓腦死亡模型，并觀察腦死亡狀態(tài)對肝臟形態(tài)、功能及免疫原性的影響，為探討改善腦死亡供體器

4、官質(zhì)量提供理論依據(jù)。
　　 方法:SD大鼠24只，隨機分為對照組(12只)和腦死亡組(12只)，對照組在麻醉后行動脈插管、氣管插管及顱骨鉆孔置管，但不行顱內(nèi)加壓。腦死亡組建立漸進式顱內(nèi)高壓腦死亡模型，呼吸機維持下，在腦死亡誘導成功后分別于0h、2h、4h、6h取標本，抽血測ALT、AST，肝組織行組織病理學檢查，免疫組化法檢測腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及主要組織相容性復合體-Ⅱ(MHC-Ⅱ)的表達，對照組麻醉維持，在對應時間

5、點取標本進行比較。
　　 結(jié)果:腦死亡組中血清ALT及AST的水平和肝組織TNF-α及MHC-Ⅱ的表達水平均較對照組升高，腦死亡誘導后肝組織病理學檢查示肝細胞變性，而且隨著誘導時間的延長，變化越明顯。腦死亡組與對照組在相應時間點的檢測水平差異均具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 結(jié)論:大鼠腦死亡狀態(tài)對肝臟形態(tài)及功能有損傷性變化，且能促進TNF-α及MHC-Ⅱ的表達，隨著腦死亡狀態(tài)維持越長，損傷程度越重，表達越明顯。<

6、br>　　 第三章：甘草酸二銨對腦死亡大鼠肝臟保護作用的實驗研究
　　 目的:建立大鼠顱內(nèi)高壓腦死亡模型，誘導成功后給予甘草酸二銨注射液來研究其對腦死亡肝臟的保護作用，并探討甘草酸二銨低濃度、中濃度和高濃度三種不同劑量對腦死亡肝臟保護作用的強弱，為臨床研究腦死亡供體保護提供重要理論依據(jù)。
　　 方法:將25只SD大鼠隨機分為三組：對照組(A組)5只、腦死亡組(B組)5只和甘草酸二銨處理組(C組)15只，A組在麻醉后行動

7、脈插管、氣管插管及顱骨鉆孔置管，但不行顱內(nèi)加壓。B組與C組建立漸進式顱內(nèi)高壓腦死亡模型，C組在腦死亡誘導后從股靜脈泵人甘草酸二銨注射液，給予劑量分別為10mg/kg(低濃度)、20mg/kg(中濃度)和30mg/kg(高濃度)，每個劑量組各5只，在腦死亡誘導后4h取標本，各組下腔靜脈取血檢測丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)，取肝組織行}玎巳染色及免疫組化法檢測腫瘤壞死因子-α(TNF-α)及主要組織相容性復合體

8、-Ⅱ(MHC-Ⅱ)的表達，TUNEL法檢測肝細胞凋亡。
　　 結(jié)果:B組及C組中血清ALT及AST的水平、肝組織TNF-α及MHC-Ⅱ的表達水平和肝組織細胞凋亡指數(shù)AI均較A組升高；C組中血清ALT及AST的水平、肝組織TNF-α及MHC-Ⅱ的表達水平和肝組織細胞凋亡指數(shù)AI均較B組低，而且C組中中濃度組降低更明顯；腦死亡誘導后B組及C組肝組織病理學檢查示肝細胞變性；C組肝組織病理學檢查示肝細胞變性較B組少，且中濃度組減少更明顯