黃酮類對實驗性糖尿病心血管改變的干預研究.pdf

1、背景：糖尿病患者極易并發(fā)心血管疾病，心血管并發(fā)癥是糖尿病患者最主要的死亡原因，高血糖誘導的氧化應激、血管內(nèi)皮損傷在糖尿病早期即可出現(xiàn)，是糖尿病心血管病變的關鍵起始事件。杭白菊總黃酮(total flavonoid of FlosChrysanthemi，TF)及其兩個主要單體成分luteolin與apigenin具有舒張血管、抗心律失常、抗心/腦缺血再灌注損傷、抗氧化應激等生物學作用，但是有關TF及其單體luteolin與apigeni

2、n干預糖尿病心血管并發(fā)癥的研究國內(nèi)外尚未見報道。
　　 目的：研究杭白菊總黃酮及其主要單體成分luteolin與apigenin對實驗性糖尿病心血管改變的干預作用以及潛在的作用機制。
　　 方法：采用鏈脲佐菌素誘導的早期糖尿病大鼠模型(造模成功8周后)、離體高濃度葡萄糖(44 mM，4 h)胸主動脈急性損傷模型及高葡萄糖(33 mM，48 h)培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)模型作為主要研究對象，首先觀察慢性整體給藥杭

3、白菊總黃酮及其主要單體成分luteolin與apigenin對早期糖尿病大鼠心臟病理結構、心肌收縮功能及心肌氧化/抗氧化各項指標的影響，探討其可能的作用機制；之后采用Organ bath系統(tǒng)檢測慢性整體給藥杭白菊總黃酮及其主要單體成分luteolin與apigenin對早期糖尿病大鼠胸主動脈內(nèi)皮依賴性舒張功能的影響，并對其可能的作用機制進行研究；最后采用高葡萄糖離體孵育血管及高葡萄糖培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞模型觀察luteolin與apig

4、enin急性給藥對高糖孵育的離體胸主動脈內(nèi)皮依賴性舒張功能及高糖培養(yǎng)內(nèi)皮細胞活度與PKC表達的影響，探討其相關機制。
　　 結果：TF(200mg/kg/d)、luteolin(10，50，100 mg/kg/d)、apigenin(10，50，100 mg/kg/d)灌胃治療8周后均不改變糖尿病大鼠血糖，但是濃度依賴性改善了糖尿病大鼠體重。TF、高劑量luteolin及apigenin抑制了糖尿病大鼠心血管氧自由基(ROS)過

5、量生成，提高了心血管組織超氧化物歧化酶(SOD)活性，減少了心肌纖維化和心室肥大，增強了糖尿病大鼠心臟收縮舒張功能、內(nèi)皮依賴性血管舒張功能、胸主動脈內(nèi)皮源性一氧化氮合酶(eNOS)活性及一氧化氮(NO)水平，減小了糖尿病心肌Ca2+誘導的線粒體滲透性轉換孔開放程度，抑制了PMA誘導的血管收縮反應。并且TF、luteolin及apigenin灌胃后對糖尿病大鼠心血管的改善作用無顯著差異，其對糖尿病大鼠的內(nèi)皮依賴性舒血管作用均被NOS抑制劑

6、L-NAME與鳥苷酸環(huán)化酶抑制劑亞甲藍所取消。luteolin及apigenin濃度依賴性舒張正常大鼠胸主動脈，功能性去除胸主動脈內(nèi)皮顯著降低了其舒張功能，急性luteolin及apigenin處理均明顯減輕了高葡萄糖對大鼠胸主動脈內(nèi)皮依賴性舒張功能的損傷(該改善作用被L-NAME所取消)，增強了高糖胸主動脈SOD與eNOS活性，減少了ROS過量生成與NO水平的下降。luteolin及apigenin共培養(yǎng)抑制了高葡萄糖導致的HUVEC

7、細胞活度下降與ROS過量生成，顯著減少了內(nèi)皮細胞膜PKCβ2的表達，對細胞質PKCβ2表達無明顯影響。
　　 結論：杭白菊總黃酮灌胃治療對糖尿病大鼠心血管的保護作用可能主要是通過其單體成分luteolin及apigenin來實現(xiàn)的，而后兩者通過增強心血管SOD活性，減少ROS過量生成，由此減少心肌MPTP開放，激活血管eNOS-NO-cGMP通路發(fā)揮對糖尿病心血管的保護作用。luteolin與apigenin抑制糖尿病血管內(nèi)皮細