肝靶向半乳糖化殼寡糖納米粒的制備與初步評價.pdf

1、藥物靶向肝臟有被動靶向及受體介導的主動靶向兩種方式。本文將上述兩種靶向原理相結合，以合成的具有肝臟靶向性的半乳糖化殼寡糖作為載體材料，使用微乳化—凝膠法制備了適合包裹水溶性陰離子藥物的肝靶向殼寡糖納米粒。 以半乳糖為原料，經乙酰化、溴代、縮合、置換、加醇等反應，合成了具有肝靶向意義的半乳糖苷：2—亞氨基-2-甲氧基乙基—1—硫代-β—D—半乳吡喃糖苷(2—imino-2-methoxyethyl—1-Thio—galactose

2、，IME-Thio—galactose)。首次使用IME-Thio—galactose對殼寡糖的氨基進行了修飾以合成具有肝靶向性質的載體材料—半乳糖化殼寡糖，并以IR、DSC及1H—NMR等方法對其結構進行了表征。 研究了微乳化—凝膠法用于制備包裹水溶性藥物的殼寡糖納米粒，發(fā)現(xiàn)由于殼寡糖在水溶液中帶有正電荷，在靜電吸引的作用下，該方法制備的納米粒對陰離子藥物能得到較高的包封率。以span—80為乳化劑，甘油為助乳化劑，液體石蠟為

3、油相，先對殼寡糖水溶液進行微乳化制備W/O微乳，然后加入Na2SO4溶液對殼寡糖進行膠凝，得到殼聚糖納米粒。采用甘草酸二銨為模型藥物，按最佳處方制得的甘草酸二銨殼寡糖納米粒(DG—COS—NPs)平均包封率88.3％，載藥量為29.4％。同法，使用半乳糖化殼寡糖的1％醋酸溶液代替殼寡糖水溶液，制得甘草酸二銨半乳糖化殼寡糖納米粒(DG—GAL—COS—NPs)，包封率為87.4％，載藥量29.1％。 測定了DG—COS—NPs和D

4、G—GAL—COS—NPs在生理鹽水中的平均pH值均在6.0左右。采用激光粒度儀測定粒徑分布，DG—GAL—COS—NPs的平均粒徑在72.8nm，顯示為單峰分布。用1％磷鎢酸溶液染色，固定5min，于透射電鏡下觀察納米粒的形態(tài)并照相，結果表明，DG—GAL—COS—NPs呈球形或類球形，分布較均勻，相互之間無粘連。加速試驗和長期穩(wěn)定性實驗表明，兩種納米粒凍干制劑在(25±2)℃加速試驗條件下和(4±2)℃長期穩(wěn)定條件下放置3個月，外觀

5、、pH值、粒徑和包封率均無顯著性變化，穩(wěn)定性良好。在去離子水中，納米粒在10min內突釋16％，然后釋藥緩慢，48h時僅釋放38％；然而在PBS緩沖液(pH=7.0，150mmol/L)中，48h時能夠釋藥完全(91％)。根據(jù)其釋藥規(guī)律推測甘草酸二銨殼寡糖納米粒的釋藥機制為依賴離子交換作用釋放藥物。 使用溶血性試驗和細胞毒性試驗(MTT法)初步驗證了COS—NPs和GAL—COS—NPs兩種納米粒的安全性。小鼠體內分布試驗結果表

6、明：靶向組(DG—GAL—COS—NPs)與未修飾對照組(DG—COS—NPs)都具有較高的肝臟累積藥物濃度。對照組受粒徑大小的影響，具有肝臟的被動靶向性，靶向組經半乳糖修飾后，較對照組，其肝臟靶向效率提高了1.52倍，表明半乳糖化殼寡糖納米?？杀蝗ネ僖核崽堑鞍资荏w識別而被肝細胞主動攝取。采用COS—NPs和GAL—COS—NPs包裹熒光物質—熒光素二鈉作為標記，給藥后30min處死小鼠，制備肝組織切片，熒光顯微鏡下觀察熒光分布和強度，