miRNA-132在移植排斥過程中作用的體外研究.pdf

1、目的：體外研究移植排斥過程中miRNA-132表達的變化，以及相應基因VEGF-A的表達，從而為有效調控移植排斥反應提供參考。
　　方法：①培養(yǎng)小鼠血管瘤內皮細胞系(EOMA)，加入異系Balb/c小鼠脾分離的T淋巴細胞，構建移植排斥反應體外模擬實驗。實驗分組包括EOMA組、EOMA+IL-2組、EOMA+IL-2+T淋巴細胞組。②分別在0、6、12、24小時收獲EOMA細胞，采用TaqMan miRNA Assays技術對各組m

2、iRNA-132的表達變化進行相對定量研究。③并進一步通過實時熒光定量PCR技術檢測VEGF-AmRNA的表達變化，通過免疫細胞化學法檢測VEGF-A蛋白的表達及MTT比色法檢測EOMA細胞的增殖。
　　結果：①EOMA+IL-2+T淋巴細胞組miRNA-132表達水平在12小時和24小時較EOMA組、EOMA+IL-2組有顯著性差異(P<0.05)，組間兩兩比較EOMA+IL-2+T淋巴細胞組明顯高于EOMA組、EOMA+IL-

3、2組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而在0小時和6小時三組間miRNA-132表達水平無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。②EOMA+IL-2+T淋巴細胞組VEGF-AmRNA表達水平在12小時和24小時較EOMA組、EOMA+IL-2組有顯著性差異(P<0.05)，組間兩兩比較EOMA+IL-2+T淋巴細胞組明顯高于EOMA組、EOMA+IL-2組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而在0小時和6小時三組間VEGF-A mRNA表達水平

4、無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。③EOMA+IL-2+T淋巴細胞組VEGF-A蛋白表達在12小時和24小時較EOMA組、EOMA+IL-2組明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，而在0小時和6小時三組間VEGF-AmRNA表達無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。④EOMA+IL-2+T淋巴細胞組EOMA細胞增長速度在12、24小時較其他兩組明顯加快，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，在0、6小時增長速度與EOMA組、EOMA+IL-2相近