抑菌肽產(chǎn)生菌的篩選及產(chǎn)物特性研究.pdf

1、乳酸菌能產(chǎn)生包括細(xì)菌素、有機(jī)酸、過(guò)氧化氫和雙乙酰等在內(nèi)的多種抗菌物質(zhì),在食品防腐上起到重要作用。本文采用牛津杯定量擴(kuò)散法檢測(cè)發(fā)酵上清液的抑菌活性,旨在篩選和鑒定高產(chǎn)廣譜細(xì)菌素的菌株、優(yōu)化發(fā)酵條件并測(cè)定所產(chǎn)細(xì)菌素的抑菌特性。
　　 從傳統(tǒng)發(fā)酵制品中分離出56株乳酸菌,經(jīng)過(guò)初篩共有27株能夠抑制金黃色葡萄球菌AS1.72、大腸桿菌AS1.543和枯草芽孢桿菌AS1.308的生長(zhǎng)。在排除有機(jī)酸及過(guò)氧化氫的干擾后,從中篩選出抑菌活性較高

2、的菌株P(guān)-347,經(jīng)常規(guī)生理生化實(shí)驗(yàn)及多糖發(fā)酵實(shí)驗(yàn),鑒定菌株P(guān)-347為短乳桿菌(Lactobacillusbrevis)。其發(fā)酵上清液經(jīng)胰蛋白酶和木瓜蛋白酶處理后抑菌活性喪失,證明發(fā)酵液中含有蛋白質(zhì)性質(zhì)的抑菌物質(zhì),即細(xì)菌素。
　　 測(cè)定菌株P(guān)-347發(fā)酵產(chǎn)細(xì)菌素的動(dòng)態(tài)曲線得出,其在MRS培養(yǎng)基中于30℃培養(yǎng)24h時(shí),發(fā)酵上清液的抑菌活性達(dá)到最高(抑菌圈直徑為26.5mm)。單因素實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在以2％葡萄糖為碳源,1％酪蛋白胨為

3、氮源,培養(yǎng)基起始pH6.5,在30℃～37℃培養(yǎng)24h時(shí)發(fā)酵上清液的抑菌活性達(dá)到最高(抑菌圈直徑為32.5mm)。此外,菌株P(guān)-347與單增李斯特菌CMCC34005混合培養(yǎng)可提高細(xì)菌素產(chǎn)量。
　　 菌株P(guān)-347所產(chǎn)細(xì)菌素有較好的熱穩(wěn)定性(100℃,2h不失去抑菌活性),其顯示抑菌活性的pH值范圍為pH2.0～6.0,2～8％(v/v)的乙醇、2～6％(w/v)的NaCl及0.5～1.5％(v/v)的表面活性劑SDS、Twee