丙泊酚不同作用時間對新生大鼠離體海馬神經(jīng)細胞凋亡的影響.pdf

1、目的：以體外培養(yǎng)的新生大鼠海馬神經(jīng)細胞為研究對象，選用不同作用時間，丙泊酚對其進行藥物干預(yù)，研究其對新生大鼠離體海馬神經(jīng)細胞凋亡的影響。
　　方法：原代培養(yǎng)新生大鼠海馬神經(jīng)細胞：健康出生7d的符合國家二級動物標準的SD新生大鼠海馬神經(jīng)細胞，體外培養(yǎng)48h后用含1％N2(神經(jīng)生長因子)添加劑DMEM/F12培養(yǎng)基全量換液，以后每3d半量換液，培養(yǎng)至第7d，取部分正常培養(yǎng)的細胞進行NSE免疫組織化學(xué)染色，鑒定為海馬神經(jīng)細胞后進行如下實

2、驗。分組與藥物處理：采用隨機數(shù)字方法，將其隨機分為8組。P1、2、3、4組為丙泊酚藥物處理組，丙泊酚處理終濃度為12ug/ml，培養(yǎng)至第7d的神經(jīng)細胞分別進行3h、
　　6h、12h、24h干預(yù)，后換成細胞完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)24h；C1、2、3、4組為對照組，不作任何處理，各組培養(yǎng)結(jié)束時間分別對應(yīng) P1、2、3、4組。培養(yǎng)結(jié)束后進行各組指標的測定：（1）MTT酶標法檢測細胞存活率；（2）Annexi-V/PI雙染流式細胞儀檢測細胞

3、凋亡率；（3）HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察細胞形態(tài)學(xué)變化。
　　結(jié)果：（1）海馬神經(jīng)細胞存活率：C1、2、3、4組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；P1組與 C1組相比，P2組與 C2組相比,細胞存活率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），P3組與 C3組相比，細胞存活率差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），P4組與C4組相比，細胞存活率具有顯著差異性（P＜0.01）；丙泊酚處理組神經(jīng)細胞存活率隨著藥物處理時間的增加而下降，P2組與

4、P1組相比，細胞存活率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；P3組與 P1組，P3組與P2組相比，細胞存活率差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），P4組與P1組，P4組與P2組、P4組與P3相比，細胞存活率均有顯著差異性（P＜0.01）。(2)海馬神經(jīng)細胞凋亡率：C1、2、3、4組之間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；P1組與C1組相比，P2組與C2組相比，細胞凋亡率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05），P3組與C3組相比，細胞凋亡率差異具

5、有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），P4組與C4組相比，細胞凋亡率具有顯著差異性（P＜0.01）；丙泊酚處理組細胞凋亡率隨著藥物處理時間的增加而升高，P2組與P1組相比，細胞存活率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；P3組與P1組，P3組與P2組相比，細胞凋亡率差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），P4組與 P1組、P4組與 P2組、P4組與P3組相比均有顯著差異性（P＜0.01）。（3）海馬神經(jīng)細胞HE染色形態(tài)學(xué)變化：P1組與 P2組和C1、