原子力顯微鏡(AFM)對霍奇金淋巴瘤HRS細胞16種抗體結(jié)合的觀察.pdf

1、目的:應用AFM直接觀察HRS細胞與抗體結(jié)合后的細胞表面抗體顆粒的變化,揭示HRS細胞來源的線索。
　　方法:用10％福爾馬林蒸汽固定法對17種常用抗體進行固定,并在AFM下掃描,觀察各抗體形態(tài)。將手術取出的HL病人的新鮮淋巴結(jié)組織進行印片,將17種抗體分別在印片上滴加,按常規(guī)免疫組化染色的步驟至顯色前水洗后室溫干燥后,置于AFM下觀察掃描,應用AFM的Tapping模式對抗體結(jié)合后的HRS細胞膜表面結(jié)構(gòu)進行掃描,獲得清晰的圖像,

2、應用AFM軟件分析系統(tǒng)測量和分析細胞膜表面的顆粒數(shù)目,得出計數(shù)。
　　結(jié)果:1、所選病例為經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤,混合細胞型。
　　2、 HRS細胞與17種抗體結(jié)合后細胞表面的顆粒數(shù)目在3-46個之間。其中3個顆粒:印片無抗體(陰性對照)、CK、CD38;5個顆粒:CD3;6個顆粒:CD20、CD30;9個顆粒:CD5、CD10;13個顆粒:CD35;14個顆粒:CD15、CD163;16個顆粒:bcl-2;17個顆粒:PAX-

3、5;23個顆粒:MUM-1;24個顆粒:LCA;34個顆粒:CD21;46個顆粒:CD68。
　　結(jié)論:應用AFM掃描的17種抗體與HRS細胞結(jié)合后的細胞表面形態(tài),其抗體顆粒數(shù)目可分為3類:少顆粒(10個以下)、中顆粒(11-20個)、多顆粒(21個以上)。這在形態(tài)上直觀地印證了HRS細胞與不同抗體結(jié)合的多態(tài)性。
　　HRS細胞可與B淋巴細胞、T淋巴細胞、樹突狀細胞、組織細胞的抗體不同程度的結(jié)合,提示HRS細胞具有多種淋巴造