DADS對(duì)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞周期阻滯及組蛋白乙?；难芯?pdf

1、目的：在前期工作的檢測(cè)上，進(jìn)一步探討二烯丙基二硫(diallyl disulfide, DADS)對(duì)人鼻咽癌CNE2細(xì)胞周期的阻滯作用，并研究組蛋白乙酰化狀態(tài)及其調(diào)控p21WAF1蛋白表達(dá)改變的情況。 方法：MTT實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞計(jì)數(shù)法觀察不同濃度和作用時(shí)間DADS 對(duì)CNE2細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用；HE染色觀察不同濃度和作用時(shí)間DADS對(duì)體外培養(yǎng)的CNE2細(xì)胞形態(tài)的影響；流式細(xì)胞術(shù)分析不同濃度和作用時(shí)間DADS對(duì)CNE2細(xì)胞的周期分布；

2、免疫印跡分析不同濃度DADS誘導(dǎo)CNE2細(xì)胞組蛋白H3和H4乙?；爸芷谙嚓P(guān)蛋白P21WAF1表達(dá)變化。 結(jié)果：MTT比色法檢測(cè)顯示，DADS能明顯抑制CNE2細(xì)胞增殖，呈濃度和時(shí)間依賴性，90μmol/L，140μmol/L，240μmol/L和400μmol/L DADS處理48h后，對(duì)CNE2細(xì)胞增殖的抑制率分別為3.33％、12.90％、28.38％和56.90％,與對(duì)照組相比，差異有顯著性意義(P<0.05)。細(xì)胞計(jì)數(shù)

3、結(jié)果表明，常規(guī)培養(yǎng)的CNE2細(xì)胞群體倍增時(shí)間為24.51h，當(dāng)DADS的濃度由90μmol/L增加到400μmol/L時(shí)，其細(xì)胞群體倍增時(shí)間由27.68h延長(zhǎng)到93.10h，與對(duì)照組比較，差異有顯著性意義(P<0.05)。細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察顯示：90μmol/L，140μmol/L，240μmol/L和400μmol/L DADS處理細(xì)胞48后，與對(duì)照組細(xì)胞相比，異型性明顯減少，核漿比例明顯減小。流式細(xì)胞儀分析結(jié)果提示：DADS呈濃度依賴性

4、將CNE2細(xì)胞阻滯在G0/G1期。Western blot分析，不同濃度的DADS處理CNE2細(xì)胞48h后，組蛋白H3乙?；谋磉_(dá)均較對(duì)照組有增加，伴有藥物濃度依賴性，90、140、240和400μmol/L 處理分別比NS對(duì)照組增加20％、32％、42％和30％，差異有顯著性（P<0.05）；與SB對(duì)照組比較時(shí)，除240μmol/L DADS處理組外，其余組均有差異顯著（P<0.05）。同期實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，組蛋白H4乙?；潭容^對(duì)照組差異無