生物轉化大果沙棘黃酮苷元工藝及產物抗氧化活性研究.pdf

1、沙棘屬植物的果實中含有豐富的黃酮類物質，近年來大量的醫(yī)學研究已經證實，沙棘黃酮具有降低膽固醇、抗氧化、抗炎和抗癌、抗輻射、抗心肌缺血、抗心率失常等多種功效，沙棘黃酮產品的開發(fā)前景廣闊。沙棘果實中的黃酮類化合物通常以糖苷的形式存在，經研究，黃酮苷的抗氧化活性低于所對應的苷元的抗氧化活性，而通過生物轉化法可以將黃酮苷轉化為苷元，提高其抗氧化活性。目前，我國對沙棘黃酮類化合物的研究主要在分離提取、生物活性及結構研究等方面，對其生物轉化的研究較

2、少。本文研究了大果沙棘中黃酮類化合物的提取工藝及其純化方法，并用生物轉化法將沙棘黃酮糖苷轉化為苷元，提高其抗氧化活性，并考察了生物轉化的條件對轉化產物抗氧化活性的影響。
　　目前，大果沙棘總黃酮的提取方法主要有水提法、有機溶劑提取法、超聲波輔助提取法、微波輔助提取法和超臨界流體萃取法。本文采用溶劑法提取大果沙棘總黃酮，并在單因素試驗基礎上，利用響應面分析法考察乙醇的體積分數、提取溫度、固液比、提取時間對總黃酮得率的影響，并對提取工

3、藝進行優(yōu)化。結果表明，最佳提取條件:提取溫度為61.85℃，乙醇體積分數為71.36％，提取時間為2.59h，液固比為18.33∶1，此條件下黃酮得率為0.741％。同其它方法比較，此方法設備簡單，成本低，適于工業(yè)化生產。
　　本文選用大孔樹脂為層析介質純化沙棘總黃酮，并研究了上樣液pH值、上樣液流速、上樣液濃度、洗脫液濃度幾個因素對吸附和解析過程的影響。最佳純化條件為:洗脫液為60％乙醇，上樣液pH值為3，上樣液流速為1mL/m

4、in，上樣液濃度為0.96mg/mL。
　　純化后的黃酮用黑曲霉、綠色木霉、灰色鏈霉菌和總狀毛霉等菌株進行生物轉化，最終篩選出黑曲霉和灰色鏈霉菌作為轉化菌株。然后分別考察了培養(yǎng)基初始pH值、轉化溫度、轉化時間，底物添加量和接種量等幾個因素對轉化反應的影響。以黑曲霉為轉化菌種時，最佳培養(yǎng)條件分別為:培養(yǎng)溫度為34℃、轉化時間為3天、底物添加量為6％、培養(yǎng)基初始pH值為5.5、接種量為9％;在此條件下大果沙棘總黃酮羥自由基清除率和總抗