細胞支架復(fù)合體促進大鼠腹部預(yù)構(gòu)皮瓣存活及其再血管化的實驗研究.pdf

1、目的:探討通過構(gòu)建大鼠羊膜上皮細胞膠原海綿支架復(fù)合體,觀察預(yù)構(gòu)皮瓣血管束附近細胞支架復(fù)合體的作用,及其對預(yù)構(gòu)皮瓣成活影響的實驗研究。
　　方法:體外培養(yǎng)羊膜上皮細胞,將第3代的大鼠羊膜上皮細胞與膠原海綿構(gòu)筑成細胞支架復(fù)合體后,光鏡下及熒光標記法分別觀察細胞種植前后的生長增殖情況;ELISA法檢測羊膜上皮細胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGF的含量,并通過熒光標記技術(shù)觀察羊膜上皮細胞支架植于體內(nèi)后細胞的存活情況;同時將軟骨細胞植

2、于膠原蛋白海綿支架。實驗分為空白對照組、軟骨細胞組、羊膜上皮細胞組和正常對照組。一期手術(shù)時,空白對照組在預(yù)構(gòu)皮瓣血管神經(jīng)束的兩側(cè)植入膠原海綿空支架,軟骨細胞組和羊膜上皮細胞組均植入帶有相應(yīng)細胞的膠原海綿支架復(fù)合體。術(shù)后第7、14天各組分別取皮瓣組織行促血管生成因子的ELISA檢測。二期手術(shù)時,將皮瓣四邊掀起后原位縫合,術(shù)后1周比較各組皮瓣存活情況,并取存活部位軟組織測定微血管數(shù)目及密度,進行分析。正常對照組大鼠未經(jīng)任何手術(shù)過程,當其它三

3、組大鼠分別經(jīng)過兩期手術(shù)后,正常對照組大鼠取腹部相應(yīng)位置的皮膚軟組織作相關(guān)指標的檢測。
　　結(jié)果:羊膜上皮細胞在膠原海綿支架上生長情況良好,細胞支架上清液中VEGF、bFGF、TGF的含量隨時間增長呈不斷上升趨勢,將細胞支架移植于體內(nèi)后經(jīng)過觀察發(fā)現(xiàn)細胞仍存活良好。組織內(nèi)各因子含量以羊膜上皮細胞組最高,其余依次為正常對照組、空白對照組及軟骨細胞組,各組之間均有差異。并且各組14天較7天的分泌量無明顯下降?？瞻讓φ战M與軟骨細胞組間皮瓣存