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文檔簡介
1、目的:探討RNA干擾survivin基因表達對肝癌細胞放射敏感性的影響。
方法:構建針對人肝癌HepG2細胞survivin基因靶序列的shRNA真核表達載體pshRNA-survivin-387。設置空白對照組(不加載體)、陰性對照組(加入pshRNA-survivin-NC)及siRNA轉(zhuǎn)染組(加入pshRNA-survivin-387),用脂質(zhì)體2000轉(zhuǎn)染HepG2細胞,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應技術檢測各組survi
2、vin基因mRNA表達水平。分別設置空白對照組、陰性對照組、siRNA轉(zhuǎn)染組、X線照射組、siRNA+X線照射組,收集各組細胞,流式細胞儀檢測細胞凋亡率,MTT法測定細胞存活分數(shù)。
結果:siRNA轉(zhuǎn)染組survivin基因mRNA表達水平明顯低于空白對照組及陰性對照組,差異有顯著性(F=218.93,q=17.73、18.66,P<0.05)。siRNA轉(zhuǎn)染+X線照射組細胞凋亡率明顯高于其他各組,差異有顯著性(F=142
3、1.83,q=13.81~57.48,P<0.05); siRNA轉(zhuǎn)染組及X線照射組與空白組、陰性組比較,細胞凋亡率也明顯提高(q=17.55~39.1,P<0.05)。siRNA轉(zhuǎn)染+X線照射組細胞存活分數(shù)顯著低于其他各組(F=2870.58,q=15.32~72.51,P<0.05); siRNA轉(zhuǎn)染組及單純X線照射組細胞存活分數(shù)與空白對照組、陰性對照組比較也明顯降低(q=11.14~73.9,P<0.05)。
結論:
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