不同EGFR基因突變檢測(cè)方法在選擇性非小細(xì)胞肺癌石蠟標(biāo)本檢測(cè)中的探索.pdf_第1頁(yè)
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1、研究背景:每年全世界肺癌新發(fā)病例大約1,200,000,其中80%以上為非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC),而且大多數(shù)診斷時(shí)已是晚期,雖經(jīng)目前的標(biāo)準(zhǔn)方案治療,其預(yù)后仍然不佳。表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一種酪氨酸激酶,與腫瘤的發(fā)生、生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移有關(guān),常常在NSCLC中過(guò)表達(dá)。因此,EGFR是腫瘤治療最有前景的治療靶點(diǎn)之一。EG

2、FR基因突變與小分子酪氨酸激酶抑制劑(tyrosine kinase inhibitors,TKIs)吉非替尼和厄洛替尼的臨床反應(yīng)有關(guān),而且在亞裔、女性、非吸煙、腺癌患者中EGFR突變率高,因此EGFR基因突變是非小細(xì)胞肺癌患者EGFR-TKI靶向治療有效的強(qiáng)的預(yù)測(cè)因子。目前使用的檢測(cè)EGFR基因突變的方法往往受腫瘤標(biāo)本限制很難適用于每一個(gè)病人,特別是晚期肺癌患者,因此靈敏、方便快捷、經(jīng)濟(jì)的檢測(cè)方法正是臨床所迫切需要的。
  目的

3、:通過(guò)比較熒光定量特異引物雙擴(kuò)增系統(tǒng)(又稱ADx-ARMS)和直接測(cè)序法在檢測(cè)45例選擇性NSCLC手術(shù)或活檢標(biāo)本EGFR基因突變的局限,探討ADx-ARMS法用于臨床常規(guī)檢測(cè)NSCLC標(biāo)本EGFR基因突變的可行性。
  方法:選取安徽省立醫(yī)院胸外科非吸煙或少量吸煙的45例手術(shù)的NSCLC患者,將福爾馬林固定石蠟包埋的手術(shù)標(biāo)本用顯微切割技術(shù)獲取腫瘤組織細(xì)胞,采用QIAamp DNA提取試劑盒提取基因組DNA,通過(guò)ADx-ARMS及

4、DNA直接測(cè)序技術(shù)分析NSCLC患者中EGFR基因突變情況。
  結(jié)果:45例NSCLC中,ADx-ARMS檢測(cè)有29例存在EGFR基因突變,突變檢出率為64.4%,其中22例為外顯子19的缺失突變,6例為外顯子21點(diǎn)突變,1例為外顯子19和21的共同突變。直接測(cè)序檢測(cè)出12例EGFR基因突變,突變檢出率為26.7%,其中9例為外顯子19的缺失突變,3例為外顯子21點(diǎn)突變,與ADx-ARMS檢測(cè)結(jié)果一致。非鱗癌EGFR基因突變率8

5、4.8%(28/33)顯著高于鱗癌患者8.3%(1/12);女性患者的突變率為83.3%(20/24)高于男性患者42.9%(9/21);兩者之間的差異均具統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值分別為P=0.000,P=0.005)。
  結(jié)論:在單中心選擇性NSCLC手術(shù)標(biāo)本中ADx-ARMS法及直接測(cè)序法均能檢測(cè)出EGFR基因的突變。該中心EGFR突變以外顯子19的缺失突變和外顯子21的點(diǎn)突變?yōu)橹?在非鱗癌和女性中EGFR基因突變發(fā)生顯著。相比直接

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