膽囊結石患者膽囊動力學變化相關研究.pdf

1、第一部分：膽囊結石形成的膽囊動力學研究
　　 目的：探討膽囊動力學異常在膽囊結石形成中的作用，為明確保膽取石手術適應證提供依據(jù)。
　　 方法：50例膽囊結石病人（病例組）和20例健康人（正常對照組），采用B超測定空腹膽囊壁厚度、空腹膽囊容積、餐后30min、60min、90min膽囊餐后殘余容積，計算膽囊排空容積EV、膽囊殘余指數(shù)RF和膽囊排空率E。病例組以正常對照組平均RF+2SD值（40.18％）為界限，分為膽囊收縮

2、“正?！苯M（n=12）和膽囊收縮“減弱”組兩個亞組（n=38）。
　　 結果:1）正常對照組膽囊壁厚度0.15+0.03cm，膽囊排空率（71.88±6.03）％。根據(jù)參數(shù)可信區(qū)間的計算方法，正常健康人膽囊壁厚度95％的可信區(qū)間為0.09～0.21 cm，膽囊排空率95％的可信區(qū)間為59.82％～83.94％。2）病例組膽囊壁厚度0.31±0.05cm，膽囊排空率（48.65±15.81）％，與正常對照組比較均有顯著差異（P<0

3、.05）。3）膽囊結石患者膽囊收縮“正?！苯M膽囊壁厚度0.28±0.05 cm，膽囊收縮“減弱”組膽囊壁厚度0.32±0.05 cm，與正常對照組比較，均有顯著差異（P<0.05），膽囊收縮“正常”組與膽囊收縮“減弱”組膽囊壁厚度比較也有顯著差異（P<0.05）。4）膽囊結石患者膽囊收縮“減弱”組與膽囊收縮“正?！苯M比較，雖然FV沒有明顯差異（P>0.05），但膽囊收縮“減弱”組最小殘余容積增大（P<0.05），膽囊排空率降低（P<0.

4、05）。膽囊結石患者膽囊收縮“正?！苯M與正常對照組比較，雖然排空率沒有明顯差異，但膽囊收縮“正?！苯M空腹膽囊容積明顯增大（P<0.05）。5）病例組膽囊結石患者的膽囊排空率與膽囊壁厚度二者呈顯著負相關，Y=106.695-185.270X，r=-0.617，P=0.000；對照組膽囊排空率與膽囊壁厚度二者無相關，Y=77.846-38.986X，r=-0.184，P=0.437。
　　 結論：膽囊排空障礙是膽囊結石形成的動力學基

5、礎之一，為臨床用藥防止膽囊結石形成及復發(fā)、保膽取石術手術適應證的選擇提供了理論依據(jù)。我們認為保膽取石術應具備的基本條件是膽囊排空率>50％，膽囊壁厚度≤0.3cm。
　　 第二部分：膽囊收縮素受體的分子生物學研究
　　 目的：探討膽囊結石患者膽囊收縮素（CCK）-A受體mRNA轉錄水平和受體分布、定位及蛋白表達水平。
　　 方法：50例膽囊結石患者（病例組）和20例無膽囊結石肝移植供體（供體組）膽囊標本，采用RT

6、-PCR方法測定膽囊標本CCK-A受體分子mRNA轉錄水平，采用酶免疫組織化學法研究膽囊CCK-A受體的分布和定位，測定膽囊標本CCK-A受體分子蛋白表達水平。
　　 結果:1）供體組膽囊CCK-A受體分子mRNA轉錄水平0.8182±0.0481，病例組mRNA轉錄水平0.6465±0.0910，兩組比較有明顯差異（P<0.01）。2）膽囊CCK-A受體分子不僅在膽囊平滑肌細胞表達，而且在腺上皮細胞也有明顯表達。蛋白表達陽性細

7、胞中，細胞核與細胞漿均有表達。3）與供體組相比，病例組免疫組化染色5個高倍視野中腺上皮細胞、平滑肌細胞蛋白表達陽性細胞數(shù)明顯減少，兩組比較有顯著差異（P<0.01）。4）供體組膽囊CCK-A受體分子蛋白表達水平（蛋白表達陽性細胞總數(shù)）和mRNA轉錄水平呈正相關，Y=-458.027+975.883X，r=0.741，P=0.000；病例組膽囊CCK-A受體分子蛋白表達水平（蛋白表達陽性細胞總數(shù)）和mRNA轉錄水平也呈正相關，Y=-43.

8、193+414.018X，r=0.644，P=0.000。
　　 結論:1）膽囊收縮素與膽囊CCK-A受體結合，不僅調(diào)節(jié)膽囊平滑肌收縮，而且還調(diào)節(jié)膽囊腺上皮細胞的分泌功能。2）膽囊CCK-A受體屬于胞核和胞質(zhì)受體（胞內(nèi)受體）。3）膽囊結石患者CCK-A受體分子mRNA轉錄水平和蛋白表達水平較低。4）膽囊結石患者膽囊CCK-A受體分子蛋白表達水平降低與mRNA轉錄水平下調(diào)是一致的。
　　 第三部分：膽囊收縮素受體表達水平對

9、膽囊收縮功能的影響
　　 目的：探討膽囊結石患者膽囊CCK-A受體分子mRNA轉錄水平和蛋白表達水平對膽囊收縮功能的影響。
　　 方法：同第二部分研究。
　　 結果:1）將病例組患者的兩個亞組（膽囊收縮“正常”組12例和收縮“減弱”組38例）進行比較，膽囊收縮“減弱”組CCK-A受體mRNA轉錄水平顯著低于膽囊收縮“正?！苯M（0.6279±0.0900比0.7055±0.0680，P<0.01）；即使是膽囊收縮“

10、正?！钡哪懯』颊撸懩褻CK-A受體mRNA轉錄水平也較無膽囊結石的供體組減少（0.7055±0.0680比0.8182±0.0481，P<0.01）。2）供體組20例，膽囊平滑肌細胞蛋白表達陽性7例、強陽性13例，而病例組50例，平滑肌細胞蛋白表達弱陽性24例、陽性22例、強陽性4例，二者比較有顯著差異（P<0.01）。病例組和供體組膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達陽性細胞數(shù)比較也有顯著差異（P<0.01）。將病例組的兩個亞組進行比

11、較，膽囊收縮“減弱”組膽囊平滑肌CCK-A受體分子蛋白表達陽性強度和陽性細胞數(shù)顯著低于無膽囊結石的供體組（P<0.01）；即使是膽囊收縮“正?！钡哪懩医Y石患者，膽囊平滑肌CCK-A受體分子蛋白表達陽性強度和陽性細胞數(shù)也較無膽囊結石的供體組低（P<0.05）。膽囊收縮“減弱”組和膽囊收縮“正?！苯M膽囊平滑肌CCK-A受體分子蛋白表達水平比較，表達陽性強度有顯著差異（P<0.05），但蛋白表達陽性細胞數(shù)無差異（P>0.05）。3）病例組膽囊

12、CCK-A受體mRNA轉錄水平與膽囊壁厚度二者呈顯著負相關，Y=0.965-1.019X，r=-0.582，P=0.000；病例組膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達水平（平滑肌蛋白表達陽性細胞總數(shù)）與膽囊壁厚度二者呈顯著負相關，Y=193.784-246.306X，r=-0.419，P=0.002。4）病例組膽囊排空率與膽囊CCK-A受體mRNA轉錄水平二者呈顯著正相關，Y=-37.558+133.493X，r=0.778，P=0.000

13、；病例組膽囊排空率與膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達水平（平滑肌蛋白表達陽性細胞總數(shù)）二者呈顯著正相關Y=13.725+0.300X，r=0.587，P=0.000。
　　 結論：膽囊結石患者CCK-A受體分子mRNA轉錄水平和蛋白表達水平與膽囊壁厚度、膽囊排空率存在數(shù)量上的相關關系，CCK-A受體分子mRNA轉錄水平和蛋白表達水平的差異可能是影響膽囊收縮功能的關鍵因素。
　　 第四部分：膽汁膽固醇濃度對膽囊收縮素受體的

14、影響
　　 目的：探討膽囊結石患者膽汁膽固醇濃度對膽囊CCK-A受體分子mRNA轉錄水平和蛋白表達水平的影響。
　　 方法：采用酶法測定膽汁膽固醇濃度，其余方法同第二、三部分研究。
　　 結果:1）供體組膽汁膽固醇濃度6.68±1.75 mmol/L，病例組膽汁膽固醇濃度9.40±2.33mmol/L，二者比較有顯著差異（P<0.01）。將病例組患者的兩個亞組進行比較，膽囊收縮“減弱”組膽汁膽固醇濃度顯著低于膽囊

15、收縮“正?！苯M，P<0.05，但膽囊收縮“正常”組膽汁膽固醇濃度和無膽囊結石的肝移植供體供體組比較，無顯著差異，P>0.05。2）膽囊壁厚度與膽汁膽固醇濃度二者呈顯著正相關，Y=0.186+0.014X，r=0.608，P=0.000。3）病例組膽囊排空率與膽汁膽固醇濃度二者呈顯著負相關，Y=98.686-5.314X，r=-0.795，P=0.000。4）供體組CCK-A受體mRNA轉錄水平與膽汁膽固醇濃度二者呈顯著負相關，Y=0.9

16、61-0.021X，r=-0.776，P=0.000；病例組CCK-A受體mRNA轉錄水平與膽汁膽固醇濃度二者也呈顯著負相關，Y=0.934-0.031X，r=-0.786，P=0.000。5）供體組膽囊CCK-A受體總蛋白表達水平（腺上皮和平滑肌細胞蛋白表達陽性細胞總數(shù)）與膽汁膽固醇濃度呈負相關，Y=523.268-27-358X，r=-0.757，P=0.000：病例組膽囊CCK-A受體總蛋白表達水平（腺上皮和平滑肌細胞蛋白表達陽性

17、細胞總數(shù)）與膽汁膽固醇濃度也呈負相關，Y=365.440-15.000X，r=-0.599，P=0.000。6）供體組膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達水平（平滑肌蛋白表達陽性細胞數(shù)）與膽汁膽固醇濃度呈負相關，Y=301.824-19.120X，r=-0.667，P=0.001；病例組膽囊平滑肌CCK-A受體蛋白表達水平（平滑肌蛋白表達陽性細胞數(shù)）與膽汁膽固醇濃度也呈負相關，Y=190.866-7.887X，r=-0.603，P=0.00

18、0。
　　 結論:1）膽囊結石患者的膽汁膽固醇濃度高于無膽囊結石的人，尤其是膽囊收縮功能差的膽囊結石患者，膽汁膽固醇濃度明顯升高。2）膽囊的慢性炎癥與膽汁膽固醇濃度有關。3）無論是膽囊結石患者，還是非膽囊結石的肝移植供體，膽囊CCK-A受體分子mRNA轉錄水平和蛋白表達水平隨著膽汁膽固醇濃度的高低而下調(diào)或上調(diào)，表明膽汁膽固醇可能是膽囊收縮功能障礙的始動因素，降低膽汁高膽固醇濃度可以促進膽囊動力功能的恢復，為預防結石的形成或復發(fā)提