外源性巨噬細胞治療小鼠繼發(fā)性細菌性腹膜炎.pdf

1、目的：1、研究細菌通過靜脈和腹腔兩種不同途徑入侵對小鼠死亡的影響，證實細菌靜脈入侵不使小鼠死亡，而腹腔入侵可使小鼠死亡，并探討腹腔注射細菌的最佳濃度。2、研究腹腔注射外源性巨噬細胞對繼發(fā)性細菌性腹膜炎小鼠轉歸的影響，探討巨噬細胞對繼發(fā)性細菌性腹膜炎小鼠的治療作用，并與抗生素的治療作用進行比較。
　　方法：1、將不同濃度大腸桿菌通過不同途徑注射入小鼠體內，實驗分為腹腔和靜脈兩大組，每大組再分為細菌濃度為1.0×107、2.0×106

2、、4×106 CFU/ml三組及PBS液對照組，觀察小鼠的體重變化、一般情況和死亡情況，得到可使50.0％小鼠死亡的腹腔注射的細菌濃度。2、利用轉瓶培養(yǎng)技術將U937細胞激活使之成為巨噬細胞，將細菌和激活U937細胞同時注射入小鼠腹腔，實驗分組為：細菌與細胞比例分別為2:1、2:5、1:5三組及細菌與PBS液對照組，觀察小鼠的體重變化、一般情況和死亡情況，摸索出不引起腹膜炎小鼠死亡的巨噬細胞濃度。3、選用使50.0％小鼠死亡的大腸桿菌濃

3、度、不引起腹膜炎小鼠死亡的激活U937細胞濃度及對大腸桿菌敏感的慶大霉素，實驗分組為：細菌+PBS液對照組，細菌+激活U937細胞組，細菌+慶大霉素組，觀察每組小鼠的體重變化、一般情況及死亡情況。
　　結果：1、細菌經靜脈入侵不影響小鼠生長，一周內小鼠體重明顯增加(P<0.05)，注射前后小鼠一般情況無差異(P>0.05)，且小鼠均無死亡。而細菌經腹腔入侵嚴重影響小鼠生長，一周內體重明顯降低(P<0.05)，一般情況均變差(P<0

4、.05)，細菌濃度為1.0×107、2.0×106、4×105 CFU/ml時小鼠死亡率分別為100.0％、50.0％、20.0％，得到腹腔注射細菌的最佳濃度為2.0×106CFU/ml。2、注射細菌和巨噬細胞的小鼠體重明顯重于注射細菌和PBS液對照組(P<0.05)，一般情況均比對照組好(P<0.05)，且小鼠的死亡率均降低，細菌與細胞比例為2:1、2:5、1:5時，小鼠的死亡率分別為40.0％、20.0％、0。當細菌與細胞比例為1:

5、5，巨噬細胞濃度為1.0×107/ml時，不引起小鼠死亡，對小鼠繼發(fā)性細菌性腹膜炎有治療作用。3、細菌與激活U937細胞或慶大霉素同時注射的小鼠體重明顯重于注射細菌與PBS液的對照組(P<0.05)，一般情況比對照組好(P<0.05)，死亡率明顯降低；此外激活U937細胞組小鼠體重明顯重于慶大霉素組(P<0.05)，一般情況比慶大霉素組好(P<0.05)，注射細菌和激活U937細胞的小鼠無死亡，而注射細菌和慶大霉素的小鼠死亡率為20.0