細(xì)胞周期調(diào)控因子CyclinD1、CDK4在肺腺癌、鱗癌中的表達及其臨床意義.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文細(xì)胞周期調(diào)控因子CyclinD1、CDK4在肺腺癌、鱗癌中的表達及其臨床意義姓名：陳董明申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：李玉20030401實驗材料與方法一、實驗材料標(biāo)本來源：收集中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院胸外科1 9 9 8 年～2 0 0 2 年的7 7 例肺癌手術(shù)標(biāo)本，均經(jīng)過病理確診。男性5 4 例，女性2 3 例；年齡3 7 ～7 8 歲，平均6 1 ．2 歲。肺腺癌3 6 例、肺鱗癌4 1例。分化

2、程度：高分化2 3 例，中分化2 1 例，低分化3 3 例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況：N 。4 3 例，N ，1 3 例，N ：2 l 例。并選取1 0 例同期肺良性病變( 肺結(jié)核3 例、支氣管擴張癥7 例) 手術(shù)標(biāo)本。所有標(biāo)本均經(jīng)1 0 ％甲醛固定，石蠟包埋。所有肺癌患者術(shù)前均未行放療、化療。主要儀器：英國產(chǎn)B R I G H T S 0 4 0 型切片機，格蘭仕牌微波爐，O L Y M P U S —B H 2 顯微鏡等。試劑：即用型鼠抗人C

3、 y c l i n D l 單克隆抗體由北京中山生物技術(shù)有限公司提供，工作濃度l ：5 0 。鼠抗人C D K 4 單克隆抗體為美國S a n t aC r u z 公司產(chǎn)品，購自北京中山生物技術(shù)有限公司，工作濃度為l ：5 0 。免疫組化試劑盒由北京中山生物技術(shù)有限公司提供。D A B 顯色試劑及其他常規(guī)試劑由中國醫(yī)科大學(xué)胸科實驗室提供。二、實驗方法s —P 免疫組化染色：所有蠟塊標(biāo)本連續(xù)5 ¨m 切片一脫蠟一滅活一抗原修

4、復(fù)一免疫組化染色一復(fù)染一脫水一封片。結(jié)果判定：C y c l i n D l 以細(xì)胞漿和( 或) 細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性，C D K 4 以細(xì)胞漿出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。每例標(biāo)本隨機觀察1 0 個高倍視野，各計數(shù)1 0 0 個腫瘤細(xì)胞中陽性細(xì)胞所占的比例。無明顯陽性細(xì)胞為陰性( 一) ；陽性細(xì)胞數(shù)小于2 0 ％為弱陽性( + ) ；陽性細(xì)胞數(shù)大于2 0 ％為陽性( + + ) 。其中弱陽性表達( + )歸人陰性( 一) 中。最終結(jié)果是