白藜蘆醇對大鼠心肌缺血再灌注損傷的作用及SIR2表達的影響.pdf

1、背景與目的:
　　冠狀動脈缺血引起的缺血性心臟病,是心血管系統(tǒng)疾病的主要死亡原因。急性心肌梗死后,即使成功溶栓或行PTCA、CABG等治療使冠狀動脈再通,也會由于再灌注損傷而使心功能減退。故保護缺血心肌細胞壽命和功能,減輕缺血再灌注心肌損傷,仍是心臟病的研究熱點。白藜蘆醇有抗氧化、清除自由基,抑制凋亡等積極作用,能防止動脈粥樣硬化、防治冠心病。白藜蘆醇的心臟保護作用及作為沉寂信息調(diào)節(jié)因子2(silent information r

2、egulator2,SIR2)酶激活劑,延長細胞壽命的作用近年來受到廣泛的關注。本實驗建立大鼠缺血再灌注模型,觀察白藜蘆醇對心肌缺血再灌注損傷、心肌細胞凋亡及SIRT1(SIR2同源基因)、半胱天冬蛋白酶3(Caspase3)表達的影響,探討白藜蘆醇對在體心肌缺血再灌注損傷作用的可能機制。
　　方法:
　　雄性Sprague Dawley(SD)大鼠隨機分為3組,即假手術組、缺血再灌注組和白藜蘆醇組,每組10只。白藜蘆醇組和

3、缺血再灌注組大鼠結扎左冠狀動脈制備心肌缺血再灌注模型,30 min后松開結扎線,再灌注2 h。假手術組只穿線不結扎。白藜蘆醇組給予10 mg/kg白藜蘆醇,假手術組及缺血再灌注組給予二甲基亞砜溶液,分別于缺血前15 min及再灌注前1 min舌下靜脈給藥。實驗過程監(jiān)測肢體Ⅱ?qū)?lián)心電圖和血流動力學指標,觀察心律失常的發(fā)生情況。實驗結束取出心臟,進行心肌組織MDA含量及SOD活性測定、蘇木精-伊紅(HE)染色、末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導的dU

4、TP缺口末端標記(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL)檢測、免疫組織化學檢測。結果以均數(shù)±標準差( x±s)表示,采用SPSS13.0 for windows軟件進行統(tǒng)計分析。
　　結果:
　　(1)再灌注期間,缺血再灌注組室速、室顫及其它心律失常發(fā)生比例高,心律失常評分(5.00±2.83)升高,有2例因再灌

5、注后嚴重心律失常而死亡。白藜蘆醇組心律失常發(fā)生比例較缺血再灌注組下降,心律失常評分(2.70±2.11)與缺血再灌注組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　(2)與假手術組相比,缺血再灌注組及白藜蘆醇組的左心室收縮壓(LVSP)及左心室內(nèi)壓最大變化速率(±dp/dtmax)在缺血30min及再灌注2h均明顯降低(P<0.01)。再灌注2h后,白藜蘆醇組的-dp/dtmax較缺血再灌注組升高(P<0.05)。
　　(3)

6、與假手術組比較,缺血再灌注組與白藜蘆醇組心肌組織 MDA含量增加,SOD活性降低,差異均有顯著性意義(P<0.01)。與缺血再灌注組比較,白藜蘆醇組MDA含量明顯減少,SOD活性升高,差異均有顯著性意義(P<0.01)。
　　(4)對SIRT1陽性細胞指數(shù)、心肌細胞凋亡凋亡指數(shù),三組觀察結果不同(F=54.791,p=0.000)。白藜蘆醇組大鼠心肌細胞的SIRT1陽性細胞指數(shù)顯著高于缺血再灌注組(P<0.01),心肌細胞的凋亡指

7、數(shù)顯著低于缺血再灌注組(P<0.01)。
　　(5)白藜蘆醇組Caspase3灰度值為27.40±1.87;缺血再灌注組灰度值為34.69±1.71,著色強度顯著高于白藜蘆醇組(P<0.01)。
　　結論:
　　白藜蘆醇具有減輕大鼠心肌缺血再灌注損傷的心臟保護作用,表現(xiàn)為減少惡性心律失常的發(fā)生;減少心肌細胞凋亡;改善心功能。白藜蘆醇對缺血再灌注心肌的保護作用可能與其抗氧化特性以及增加SIR2表達,抑制Caspase3表