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文檔簡介
1、目的:研究熊果酸(Ursolic Acid,UA)對ox-LDL誘導人臍靜脈內(nèi)皮細胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)氧化損傷的保護作用,并進一步探討該作用是否通過Keap1-Nrf2-ARE信號通路實現(xiàn)。
方法:體外培養(yǎng)人臍靜脈內(nèi)皮細胞待細胞生長密度為80%時,進行分組處理,分成六組:對照組不加任何處理;ox-LDL組,加入ox-LDL培養(yǎng)24h,終濃度為20mg/
2、L; ox-LDL+低濃度熊果酸組,加入熊果酸(濃度1.5μmlo/L)及ox-LDL(濃度20mg/L)共同培養(yǎng)24h;ox-LDL+中濃度熊果酸組,加入熊果酸(濃度3.0μmlo/L)及ox-LDL(濃度20mg/L)共同培養(yǎng)24h; ox-LDL+高濃度熊果酸組,加入熊果酸(濃度6.0μmlo/L)及ox-LDL(濃度20mg/L)共同培養(yǎng)24h; ox-LDL+維生素E組(對照藥物組),加入維生素E(濃度200mg/L)及ox-
3、LDL(濃度20mg/L)共同培養(yǎng)24h。待細胞培養(yǎng)結束后,采用MTT試驗方法測定細胞吸光值,進而計算細胞生存率;采用逆轉錄聚合酶鏈式反應(RT-PCR)及Western blot分別在mRNA和蛋白水平檢測Keap1、Nrf2、HO-1的表達情況。
結果:對照組、ox-LDL組、ox-LDL+低濃度熊果酸組、ox-LDL+中濃度熊果酸組、ox-LDL+高濃度熊果酸組、對照藥物組各組兩兩比較,細胞吸光值、細胞生存率、HO-1
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