自體富血小板血漿干預(yù)兔早期椎間盤退變的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的椎間盤退變(intervertebral disc degeneration,IDD)早期的生物學(xué)治療有望阻止甚至逆轉(zhuǎn)其病變過程。富血小板血漿(platelet-rich plasma,PRP)含多種生物活性因子,如PDGF、TGF-β,IGF-1、VEGF等,這些生物活性因子具有刺激椎間盤細(xì)胞增殖、促進(jìn)細(xì)胞外基質(zhì)合成代謝及抑制纖維環(huán)細(xì)胞凋亡等功能。本研究通過全纖維環(huán)針刺法制備椎間盤早期退變模型并予以自體PRP干預(yù),觀察自體PRP對

2、早期椎間盤退變的干預(yù)效果。
  方法取健康成年新西蘭大白兔45只,體重2.5-3.0kg,雌雄不限。于兔耳中央動脈取血,采用Landesberg等的方法制備PRP,同時對全血及PRP行血小板計數(shù)。采用纖維壞針刺(L4/5、L5/6)的方法建立椎間盤退變模型,將所有兔子隨機分為3組(n=15)。實驗組:在模型建立2周時將100μlPRP分別注入L4/5、L5/6椎間盤;對照組:在相同間隙注入100μl的PBS液。假手術(shù)組:僅分離暴露

3、椎間盤,不作任何處理。在模型建立2周時及干預(yù)后第1、2周,每組隨機取5只兔子行腰椎MRI、組織學(xué)及Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)檢查,并進(jìn)行兔腰椎MRI退變程度評分,HE染色形態(tài)學(xué)觀察及Ⅱ型膠原陽性積分光密度檢測。
  結(jié)果血小板計數(shù)顯示兔PRP中血小板約為外周血的4.92倍。模型建立兩周時,和假手術(shù)組相比,實驗組和對照組腰椎手術(shù)節(jié)段椎間盤T2加權(quán)信號降低、變暗,組織學(xué)觀察示髓核細(xì)胞數(shù)量減少,基質(zhì)退行性變,免疫組織化學(xué)染色示Ⅱ型膠原陽性積分

4、光密度降低,顯示造模成功。PRP干預(yù)后第1、2周,同一時間點觀察,腰椎MRI顯示實驗組退變程度及評分均低于對照組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。干預(yù)后同一時間點觀察,對照組椎間盤結(jié)構(gòu)紊亂,髓核細(xì)胞數(shù)量明顯減少。而實驗組髓核細(xì)胞數(shù)量及軟骨樣基質(zhì)多,基質(zhì)纖維化程度輕。和對照組相比,實驗組Ⅱ型膠原的表達(dá)明顯增強,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。實驗組PRP干預(yù)前后多個時間點連續(xù)觀察,Ⅱ型膠原表達(dá)的變化不明顯,而對照組Ⅱ型膠原表達(dá)隨時間呈

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