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文檔簡介
1、背景與目的:2,3-吲哚醌(2,3-dioxoindoline,ISA)是一種內源性吲哚類化合物,是單胺氧化酶(MAO)B的抑制因子,在大鼠的帕金森病癥模型中,能改善反應遲緩,提升紋狀體多巴胺水平,并且已被證明具有抑制腫瘤生長的作用,如N1E-115、BALB/C3T3、BBC、HL60、PC12、神經母細胞瘤等等,為證實ISA對其他細胞株是否具有抑制增殖和促凋亡作用,我們選取人乳腺癌細胞株MCF-7和人大腸癌細胞株HT-29作為研究對
2、象。 方法:應用MTT比色法檢測2,3-吲哚醌對MCF-7和HT-29的生長抑制情況;Hoest33258熒光染色法觀察細胞凋亡的形態(tài)學改變;RT-PCR兩步法檢測凋亡抑制基因bcl-2和凋亡促進基因bax在mRNA水平上的變化;Westem Blotting法檢測bcl-2和bax在蛋白水平上的表達。 結果:不同濃度2,3-吲哚醌(0、50、100、200、400μmol/L)作用MCF-7及HT-29細胞株24、48
3、、72 h后,能明顯抑制細胞生長,并呈現時間和劑量依賴效應;400μmol/L2,3-吲哚醌作用細胞48 h后熒光染色可觀察到細胞染色質邊集,核濃縮核碎裂,并出現典型的凋亡小體;bcl-2蛋白及mRNA的表達隨藥物濃度增大而逐漸減少,各組間差別有明顯的統(tǒng)計學意義(P<0.05),bax蛋白及mRNA的表達隨藥物濃度增大而無明顯變化,各組間差別無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。 結論:2,3-吲哚醌可能通過下調bcl-2的表達來抑制腫
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