p53非依賴性信號通路在MMS致細胞凋亡中的機制研究.pdf

1、MMS，又名甲磺酸甲酯，是一種典型的甲基化試劑。MMS作為重要的治療癌癥的化療藥物，能夠?qū)е录毎l(fā)生DNA雙鏈斷裂(DSB)。DNA雙鏈斷裂的形成是許多抗癌藥物發(fā)揮藥效的重要標志。目前眾多研究證明，MMS能夠誘導不同細胞株中p53依賴性信號通路介導的細胞凋亡的發(fā)生。然而，當p53基因敲除時，細胞仍然表現(xiàn)出對MMS藥物相似的敏感性，從而證明在誘導細胞凋亡過程中p53非依賴性信號通路的存在。
　　 為了進一步研究MMS誘導的細胞凋亡

2、中p53非依賴性信號通路的具體機制，本實驗建立了MMS誘導細胞凋亡的實驗模型。實驗選取了2種細胞株，分別為p53基因缺失的H1299細胞和Hep3B細胞。并確定了MMS染毒的5種濃度，分別為50μM、100μM、200μM、400μM和800μM。實驗結(jié)果證明，在MMS染毒時間為12h，染毒濃度為50μM、100μM、200μM、400μM和800μM時，兩種細胞株中均出現(xiàn)γH2AX焦點，即細胞發(fā)生不同程度的DNA損傷。在MMS染毒時間

3、為12h，染毒濃度為400μM和800μM時，兩種細胞株均發(fā)生細胞凋亡。這一細胞凋亡的過程涉及到線粒體膜通透性的降低，Caspase2蛋白從細胞核到細胞質(zhì)的轉(zhuǎn)移，細胞色素C的釋放，以及Caspase9的剪切激活等。然而，MMS誘導的細胞凋亡不能夠激活p53家族成員TAp73以及DNp73的參與。綜上所述，MMS誘導的這兩種細胞凋亡為p53非依賴性以及p73非依賴性的信號通路介導的，而凋亡的發(fā)生與Caspase2從細胞核到細胞質(zhì)的轉(zhuǎn)移激活