白樹花多糖的結構及其抗凝血活性研究.pdf

1、白樹花[Polyporus albicans(Imaz.) Teng]主要分布于中國吉林省，屬于擔子菌綱多孔菌科多孔菌屬，是一種可食用和藥用的真菌。目前對白樹花多糖的研究報道較少，只有國內對其結構和免疫活性進行了初步研究。但是白樹花多糖的精確結構研究以及對多糖進行硫酸化修飾后的抗凝血活性研究未見報道。因此本研究將白樹花真菌多糖進一步分離純化，對其結構、硫酸化修飾及修飾后多糖的抗凝血活性進行研究，以期為白樹花多糖的進一步開發(fā)利用提供理論基

2、礎。
　　白樹花粗多糖經凍融、醇分級、蛋白酶法和Sevage法脫蛋白、HPLC分離后得到一個主要的純化組份—PATP I。經HPLC分析表明:白樹花多糖PATP I由葡萄糖、甘露糖、半乳糖組成，其摩爾比為15.7∶4.2∶1，分子量為33 kDa。
　　采用部分酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、甲基化、GC-MS、IR、NMR等方法對PATP I進行測定分析，確定其分子結構為:主鏈由(1→2)-β-D-Man殘基、以及少量

3、的(1→3)α-Glc構成，分支點為(1→2，6)-β-Glc殘基;支鏈豐富，平均每2個己糖殘基就會出現一個分支。推斷PATP I結構的重復單元為:
　　Glc1→6
　　Glc(1→6)Gal1→6
　　→3)Glc(1→2)Glc(1→2)Man(1→2)Glc(1→2)Man(1→2)Glc(1→2)Man(1→2)Glc(1→2)Man(1→
　　6←1 Glc
　　6←1 Glc
　　采用氯

4、磺酸-吡啶法對白樹花多糖進行了硫酸化修飾，結果顯示:多糖硫酸化修飾后紅外光譜(IR)出現1250cm-1的S=O特征吸收峰;Sepharose CL-6B柱層析結果表明硫酸化修飾后多糖樣品的洗脫峰峰位前移，即硫酸基的引入使多糖的分子量明顯增大，多糖中的部分羥基被硫酸酯基團所取代。離子色譜法分析測得硫酸基占14.7％，取代度為Ds=1.41。
　　體外抗凝血研究結果表明，白樹花多糖硫酸酯具有良好的抗凝血效果;其抗凝血功能主要通過抑制

5、內源凝血系統(tǒng)的凝血因子發(fā)揮作用，與肝素的抗凝血機理基本一致，即通過與抗凝血酶Ⅲ(ATⅢ)結合，進一步抑制凝血因子Ⅱa和Ⅹa而發(fā)揮抗凝血作用;動物體內抗凝血實驗結果與體外實驗結果是一致的，而且在使用12小時內未發(fā)現對動物血液、肝腎功能有不良影響。
　　肝素在防止血栓形成及治療方面在臨床上廣泛使用，但是存在較多的副作用，因此尋找肝素的替代品一直是備受關注的研究課題。本研究結果顯示白樹花多糖硫酸酯抗凝血效果及初步的安全評價均比較良好，具