電刺激小腦頂核對(duì)移植神經(jīng)干細(xì)胞存活、遷移與分化的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：采用神經(jīng)干細(xì)胞(Neuralstemcells，NSCs)移植與電刺激小腦頂核(Fastigialnucleusstimulation，F(xiàn)NS)相結(jié)合，探討整體干預(yù)對(duì)移植NSCs存活、遷移與分化的作用。 方法：體外分離、培養(yǎng)新生大鼠海馬EGF反應(yīng)性NSCs，Brdu標(biāo)記，并用胎牛血清誘導(dǎo)，觀察其多向分化潛能；將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分為A組：FNS+MCAo+NSCs；B組：FNS+MCAo+PBS；C組：MCAo+NSCs；D組：MC

2、Ao+PBS。A組與B組在MCAo前24h進(jìn)行小腦項(xiàng)核刺激，四組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在MCAo后24h將NSCs或PBS注入梗死同側(cè)側(cè)腦室內(nèi)，記錄梗死后6h、24h、3d、7d、14d、28d大鼠的神經(jīng)功能，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；分別在移植后3d、7d、14d、28d處死大鼠，以梗死灶為中心切片，Brdu免疫組化染色，觀察移植NSC的存活與遷移；A組與C組在移植28天先行Brdu免疫組化染色，鏡下確定Brdu陽性細(xì)胞后，其臨片行Brdu/NSE免疫熒光雙

3、標(biāo)染色，觀察移植細(xì)胞的分化。 結(jié)果：分離培養(yǎng)的EGF反應(yīng)性細(xì)胞表達(dá)nestin抗原，并有自我更新及多向分化潛能。經(jīng)Brdu標(biāo)記后，90﹪以上NSCs表達(dá)Brdu抗原。移植28天內(nèi)A組功能評(píng)分與其它三組有顯著差異，C組與D組在移植28天內(nèi)功能評(píng)分未見顯著性差異。A組在移植7d、14d、28d存活細(xì)胞數(shù)顯著多于C組。A組Brdu/NSE雙標(biāo)陽性細(xì)胞所占總體存活細(xì)胞比率顯著多于C組。 結(jié)論：體外培養(yǎng)的大鼠海馬EGF反應(yīng)性NSC