Tiaml相互作用蛋白的篩選、鑒定及其功能的初步研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學2010級博士學位論文Tiaml相互作用蛋白的篩選、鑒定及其功能的初步研究ScreeningandIdentificationofproteininteractingwithTiamlanditspreliminaryfunctionalstudies課題來源：國家自然科學基金(30801380，81101822)廣州市科技計劃重點項目(11C26090521)學位申請人導師姓名專業(yè)名稱培養(yǎng)類型培養(yǎng)層次所在學院黃靜陳龍華教授

2、腫瘤學專業(yè)學位全日制博士第一臨床醫(yī)學院2013年3月20日廣州中文摘要來開展的蛋白質組學技術為揭示腫瘤發(fā)生發(fā)展機制帶來了新的希望，而對蛋白質的生物學功能研究也成為當前的研究熱點。Tiaml(TlymphomainvasionandInetaStasisl，T淋巴瘤侵襲轉移基因)蛋白是我們在前期研究中發(fā)現(xiàn)的肝癌轉移相關蛋白。在前期研究中，我們通過對213例具有完整臨床隨訪資料的肝癌組織標本進行了免疫組織化學檢測，結果顯示：Tiaml在肝癌

3、組織中高表達，且表達水平與肝癌患者預后、轉移密切相關，可以作為判斷肝癌患者預后的指標。Tiaml在8種肝癌細胞中的表達水平明顯高于人正常肝細胞株。我們以人原發(fā)性肝癌高、低轉移細胞株(HCCLM6，MHCC97L)為研究對象，采用基因轉染和RNAi技術從細胞和動物水平證明了Tiaml過表達能促進肝癌增殖、侵襲、轉移，相反沉默內源性Tiaml表達降低了肝癌增殖、侵襲、轉移能力。研究結果為闡明肝癌轉移機制及尋找預測肝癌轉移的潛在標志物提供了理

4、論依據(jù)。尋找Tiaml蛋白的相互作用蛋白是進一步理解Tiaml蛋白功能的一個重要途徑。本研究擬在前期研究的基礎上，利用酵母雙雜交技術篩選Tiaml相互作用蛋白，為闡明肝癌發(fā)生、發(fā)展機理，尋找腫瘤早期診斷和治療的靶標提供重要理論依據(jù)。方法1酵母雙雜交篩選Tiaml相互作用蛋白11構建酵母雙雜交誘餌表達載體首先應用基因重組技術，以商品化的人TiamlcDNA克隆為模板，構建Tiaml蛋白酵母表達質粒pGBKT7Tiaml／C1199。將其轉