TM4SF3在不同時期子宮內膜表達的研究.pdf

1、背景：自1978年首次開展體外受精-胚胎移植(IVF-ET)技術以來,人類輔助生殖技術(ART)得到飛速發(fā)展,1980年促排卵藥物的使用更增加了排卵率,但胚胎種植率仍處于較低水平,波動于25％-35％之間,其中一個重要因素即促排周期子宮內膜容受性(uterine receptivity)降低,這已成為影響ART成敗的主要問題之一。眾所周知,胚胎通過對子宮內膜上皮的定位和黏附,穿透上皮基底層的連接細胞并侵入內膜基質等一系列生理過程最終植入

2、子宮內膜,而成功的胚胎植入取決于優(yōu)質的胚胎和良好的子宮內膜容受性的同步發(fā)育。有資料表明因子官內膜容受性問題導致胚胎種植失敗占所有胚胎種植失敗的三分之二,而胚胎質量問題僅占三分之一。在每個有排卵的月經周期中子宮內膜只有在極短的時間內才允許胚胎植入,這段時間稱為“種植窗期”,此時子宮內膜形態(tài)組織結構和分泌蛋白都發(fā)生一系列變化,使子宮內膜的容受性達到最大,以利于胚胎著床,普遍認為在排卵后6—8天出現(xiàn),并持續(xù)4天左右,即正常月經周期的第20-2

3、4天。這是一個復雜而又精確的生理過程,子宮內膜通過內分泌、旁分泌及自分泌的調節(jié),產生多種粘附分子、細胞因子,并對胚胎植入進行調控,已有大量文獻表明整合素αvβ3、選擇素L、鈣黏蛋白E、免疫球蛋白ICAM-1等粘附分子,血小板抑制因子、白介素-1、白介素-6等細胞因子以及胎盤蛋白14、前列環(huán)素、催乳素等在月經周期呈周期性表達,其高水平表達出現(xiàn)時間與子宮內膜的種植窗期開放同步。四次跨膜超家族成員-3(transmembrane4 super

4、family-3,TM4SF3)在結直腸癌、胰腺癌、肝癌及食管癌等腫瘤中存在較高的表達,并能通過促血管再生作用促進相關腫瘤的進展。胚胎發(fā)育與腫瘤形成之間存在著諸多的相似之處,尤其是滋養(yǎng)層細胞侵入子宮內膜的過程與腫瘤細胞的侵襲現(xiàn)象十分類似,均涉及廣泛的細胞外基質的降解與重塑。Horcajadas通過基因芯片對不同階段子宮內膜種植窗時期的各種基因表達進行篩查,發(fā)現(xiàn)TM4SF3在自然周期胚胎種植窗時期(LH+7)存在表達,其表達在置入官內節(jié)育

5、器后明顯降低,同時在宮內節(jié)育器取出后兩個月及1年的時間仍未恢復正常水平,提示TM4SF3與子宮內膜容受性之間可能存在一定關系。
　　 目的：檢測四次跨膜超家族成員TM4SF3在不同周期組的子宮內膜表達定位及表達強弱差異,并與子宮內膜容受性之間的可能聯(lián)系。
　　 方法：吸取管性不孕和男性不孕擬行IVF-ET治療的患者內膜,按入組條件分為自然周期組、促排周期組和激素替代周期組,采用實時熒光定量PCR(real-time PC

6、R)和免疫熒光(Immunofluorence)技術檢測TM4SF3在mRNA及蛋白質水平的表達及其表達定位。
　　 結果：⑴TM4SF3在子宮內膜呈周期性表達,其表達定位于胞漿內,以腔上皮細胞及腺上皮細胞胞漿較為豐富；⑵自然周期種植窗期子宮內膜TM4SF3在mRNA及蛋白水平的表達均高于增生期,并在mRNA水平有統(tǒng)計學差異(0.562±0.0296 vs13.582±9.001,p<0.005)；⑶促排周期種植窗期子宮內膜TM

7、4SF3的表達較促排周期增生晚期及分泌早期升高,以腔上皮及腺上皮表達升高相對明顯,同時在mRNA水平有顯著性差異(0.234±0.156 vs30.488±14.854,0.234±0.156 vs1.506±1.427,p<0.001)；⑷.促排周期種植窗時期子宮內膜TM4SF3的表達高于自然周期種植窗期和激素替代種植窗期TM4SF3的表達,以腺上皮表達升高相對明顯,同時在mRNA水平有顯著性差異(30.488±14.854 vs13

8、.582±9.001,p<0.001；30.488±14.854 vs5.014±3.922,p<0.001)。
　　 結論：TM4SF3在人子宮內膜組織呈周期性表達,并定位于細胞漿內,同時在子宮內膜種植窗時期表達升高,以腔上皮和腺上皮升高較明顯,提示TM4SF3可能參與子宮內膜容受性的建立與調控。TM4SF3在促排周期子宮內膜種植窗的表達顯著高于自然周期和激素替代周期,可能與促排周期激素水平過高有關,提示雌孕激素可能在種植窗時