排尿中樞之間的形態(tài)學關(guān)系研究.pdf

1、排尿和控尿神經(jīng)機制是一個完整的系統(tǒng)，近年來雖然得到了廣泛的研究，但仍然有很多方面還不是很清楚，需要進一步的研究。任何一個環(huán)節(jié)受到損壞，都會導致神經(jīng)源性的排尿功能障礙。脊髓損傷和腦脊膜膨出等原因?qū)е碌纳窠?jīng)源性膀胱一直是醫(yī)學上的一大難題。既往的一些治療措施如間歇導尿、選擇性骶神經(jīng)根切斷、骶神經(jīng)前根電刺激等，療效均不理想。肖傳國于1998年提出設(shè)想：利用脊髓損傷平面以下的廢用神經(jīng)，建立人工體神經(jīng)－內(nèi)臟神經(jīng)反射弧，形成一種經(jīng)體表皮膚控制的神經(jīng)反

2、射路徑用以實現(xiàn)膀胱的可控性排尿，動物實驗和臨床研究均獲得極大成功。之后，肖氏又把人工體神經(jīng)－內(nèi)臟神經(jīng)反射弧理論運用于大小便功能障礙的腦脊膜膨出病人，亦獲得明顯效果。人工體神經(jīng)－內(nèi)臟神經(jīng)反射弧為治療神經(jīng)源性膀胱開辟了新的方向，多項研究已基本闡明了人工體神經(jīng)－內(nèi)臟神經(jīng)反射弧的作用機制，但為何能同時恢復腦脊膜膨出病人排尿的感覺功能尚待進一步研究，本研究著力于正常大鼠的排尿神經(jīng)機制的形態(tài)學基礎(chǔ)，為進一步闡明人工體神經(jīng)－內(nèi)臟神經(jīng)反射弧理論打下基礎(chǔ)

3、。 一脊髓排尿反射通路的形態(tài)學研究 目的：從形態(tài)學上研究大鼠脊髓水平的排尿反射路徑。 方法：應用神經(jīng)追蹤的方法，于SD大鼠右側(cè)膀胱壁注入結(jié)合霍亂毒素B亞單位的辣根過氧化物酶(CB-HRP)，研究膀胱感覺傳人末梢在脊髓內(nèi)的分布部位。于腰1－腰2(L1-L2)節(jié)段的中間與外側(cè)細胞柱(IML)區(qū)電泳入30％HRP，腰6－骶1(L6-S1)節(jié)段的右側(cè)骶副交感核(SPN)電泳入4％結(jié)合麥芽凝集素的辣根過氧化物酶(WGA-H

4、RP)，分別在L6-S1段脊髓檢測逆標神經(jīng)元和L1-L2節(jié)段檢測順行示蹤末梢。SPN區(qū)逆標的神經(jīng)元再用乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶抗體行免疫組化的方法鑒別副交感節(jié)前神經(jīng)元。 結(jié)果：膀胱感覺末梢從脊髓后角進入脊髓后，有兩個主要分布走向，分別沿脊髓右側(cè)后角的兩側(cè)至L6-S1節(jié)段SPN和脊髓后聯(lián)合核(DCN)。于右側(cè)交感中樞即L1-L2節(jié)段IML區(qū)電泳入辣根過氧化物酶后，在右側(cè)SPN的背內(nèi)側(cè)發(fā)現(xiàn)有逆標的體積較小的神經(jīng)元，且為非膽堿能性，且該神經(jīng)元的

5、所在部位正好位于膀胱的感覺末梢分布的部位。于SPN給WGA-HRP后，發(fā)現(xiàn)在L1-L2節(jié)段右側(cè)IML區(qū)有順行標記的神經(jīng)末梢。 結(jié)論：脊髓內(nèi)部除了有盆神經(jīng)—中間神經(jīng)元—副交感中樞—盆神經(jīng)的排尿反射通路以外，可能還存在有盆神經(jīng)—中間神經(jīng)元—交感中樞—交感神經(jīng)節(jié)—腹下神經(jīng)的反射路徑。 二膀胱低位控制中樞之間的形態(tài)學研究 目的：研究大鼠脊髓內(nèi)控制膀胱的交感中樞和副交感中樞之間的形態(tài)學關(guān)系。 方法：通過神

6、經(jīng)示蹤的方法，在不同組SD大鼠的右側(cè)腹下神經(jīng)和主盆神經(jīng)節(jié)(MPG)給予銀光金(FG)，確定膀胱的交感和副交感低位控制中樞的部位，于膀胱右側(cè)交感神經(jīng)節(jié)前神經(jīng)元所在部位及骶副交感核分別給予辣根過氧化物酶(HRP)和結(jié)合麥芽凝集素的辣根過氧化物酶(WGA-HRP)，分別在L6-S1和L1-L2節(jié)段檢測逆行標記細胞和順行標記末梢，并且通過免疫組化的方法鑒別副交感節(jié)前神經(jīng)元(乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶陽性)和中間神經(jīng)元。 結(jié)果：腹下神經(jīng)和盆節(jié)給予FG

7、，逆標交感節(jié)前神經(jīng)元主要位于L1-L2節(jié)段的后聯(lián)合核(DCN)及雙側(cè)中間外側(cè)細胞柱(IML)，且二者之間有個別散在的FG陽性神經(jīng)元。給藥側(cè)IML內(nèi)的逆標神經(jīng)元顯著多于對側(cè)。副交感節(jié)前神經(jīng)元主要位于同側(cè)L6-S1節(jié)段的SPN區(qū)，對側(cè)沒有出現(xiàn)逆標的神經(jīng)元。于L1-L2節(jié)段IML區(qū)給予HRP，在SPN的背內(nèi)側(cè)發(fā)現(xiàn)有逆標胞體較小、多角型的非膽堿能性神經(jīng)元。于右側(cè)SPN中電泳入WGA-HRP，在L1-L2節(jié)段右側(cè)IML區(qū)發(fā)現(xiàn)有順行標記的神經(jīng)末梢。

8、 結(jié)論：膀胱的低位交感中樞和副交感中樞之間存在有形態(tài)學上的聯(lián)系，骶副交感核背內(nèi)側(cè)組的中間神經(jīng)元可能在二者之間起協(xié)調(diào)作用。 三腦橋排尿中樞和脊髓交感中樞之間的形態(tài)學研究 目的：研究腦橋排尿中樞(PMC)同交感神經(jīng)及副交感神經(jīng)協(xié)同作用的形態(tài)學基礎(chǔ)。 方法：用順行神經(jīng)追蹤劑生物素標記的葡聚糖胺(BDA)電泳入SD大鼠右側(cè)腦橋排尿中樞(PMC)，檢測投射到腰6至骶1脊髓節(jié)段的神經(jīng)末梢。用熒光金(FG)注

9、入右側(cè)盆節(jié)逆行標記副交感神經(jīng)節(jié)前神經(jīng)元(PPNs)，并且通過乙酰膽堿轉(zhuǎn)移酶抗體免疫組化的方法判斷證實該逆標的神經(jīng)元。于L1-L2節(jié)段IML區(qū)和L6-S1節(jié)段骶副交感核(SPN)分別給予辣根過氧化物酶(HRP)和麥芽凝集素結(jié)合的辣根過氧化物酶(WGA-HRP)，分別在L6-S1檢測逆標神經(jīng)元和L1-L2節(jié)段檢測順行示蹤末梢。 結(jié)果：于L1-L2節(jié)段IML區(qū)交感節(jié)前神經(jīng)元所在部位給予辣根過氧化物酶(HRP)，在同側(cè)SPN的背內(nèi)側(cè)發(fā)現(xiàn)

10、有逆標的非膽堿能性神經(jīng)元，胞體顯著小于副交感神經(jīng)節(jié)前神經(jīng)元(P＜0.05)。BDA標記的神經(jīng)末梢主要位于L6-S1節(jié)段雙側(cè)中間側(cè)細胞柱(IML)區(qū)(SPN的所在部位)及后聯(lián)合核區(qū)，并發(fā)現(xiàn)有些末梢和同側(cè)逆標的HRP陽性神經(jīng)元有突觸聯(lián)接，但在L6-L1節(jié)段沒有發(fā)現(xiàn)BDA逆行標記的神經(jīng)元。在中腦導水管的兩側(cè)腹外側(cè)區(qū)發(fā)現(xiàn)有大量BDA逆標的神經(jīng)細胞。SPN中電泳入WGA-HRP，發(fā)現(xiàn)在L1-L2節(jié)段IML區(qū)有順行標記的神經(jīng)末梢。 結(jié)論：腦