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文檔簡介
1、目的:研究中藥抗顫寧方對PD大鼠神經行為的改善作用并探討其作用機制。
方法:所有大鼠喂養(yǎng)一周后隨機分出8只作為假手術組,右側黑質注射生理鹽水;其余造模,參照文獻大鼠腦立體定位圖譜,確定右側黑質兩坐標,然后兩點注射6-OHDA,術后2周進行行為學檢測,并記錄旋轉開始時間、結束時間和旋轉圈數。造模成功大鼠隨機分成模型組、中藥組、西藥組各8只。灌胃給藥2周后用APO誘導,測試大鼠旋轉行為并記錄旋轉開始時間、結束時間和旋轉圈數。未
2、次灌藥后次日將大鼠進行麻醉,然后打開胸腔,充分暴露心臟,用5ml注射器針頭刺進左心室,取不抗凝全血3ml,靜置20分鐘后用低速離心機3000r/min離心15min后取血清,-37℃冰箱保存,以比色法分別測定血清中超氧化物歧化酶(SOD)的活性、丙二醛(MDA)含量及NO含量;取血后灌注作內固定,當見大鼠出現四肢抽搐、四肢變硬時,灌注完成,而后斷頭取腦浸泡于4%多聚甲醛溶液中放4℃冰箱固定24小時,然后用PBS漂洗,梯度酒精脫水,二甲苯
3、透明,浸蠟,石蠟包埋。作石蠟連續(xù)冠狀切片,切片直接貼覆于明膠包被的載玻片上,每塊組織間隔選取4張切片,將切片脫蠟,用PBS沖洗后固定,然后按SABC法作TH免疫組織化學染色,200倍相差顯微鏡下分別累計右側黑質的TH免疫反應陽性神經元數目并記算其均數。
結果:與治療前比較,中藥組與西藥組的平均轉速、持續(xù)時間均下降且有統(tǒng)計學意義;說明中藥組與西藥組均可改善PD大鼠的臨床癥狀。治療后中藥組較西藥組的平均轉速、持續(xù)時間均減小且有
4、統(tǒng)計學意義,說明中藥組在改善PD大鼠部分癥狀方面優(yōu)于西藥組。與假手術組比較,模型組與西藥組大鼠SOD活性均較假手術組明顯下降(P<0.01),中藥組大鼠SOD活性與假手術組比較無差別(P>0.05);模型組大鼠MDA含量與假手術組、中藥組、西藥組比較均明顯升高(P<0.05),而中藥組與西藥組大鼠MDA含量與假手術組比較無差別(P>0.05);模型組大鼠NO含量與假手術組、中藥組、西藥組比較均明顯升高(P<0.05),而中藥組與西藥組大
5、鼠NO含量與假手術組比較無差別(P>0.05)。假手術組、中藥組、西藥組大鼠右側黑質的TH陽性細胞計數均多于模型組(P<0.01);中藥組大鼠右側黑質的TH陽性細胞計數亦多于西藥組(P<0.05);假手術組大鼠右側黑質的TH陽性細胞計數多于西藥組(P<0.01);中藥組大鼠右側黑質的TH陽性細胞計數與假手術組無差別(P>0.05)。
結論:抗顫寧方和美多巴均能明顯改善PD大鼠旋轉行為,但抗顫寧方在改善部分癥狀方面優(yōu)于美多巴
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