參蘇飲加減治療病毒性心肌炎的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：病毒性心肌炎（VMC）是由多種病毒感染（尤其是柯薩奇B組病毒，CVB）引起的，以局灶性或彌漫性心肌細(xì)胞變性、壞死及間質(zhì)非特異性炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維滲出為主要病理改變，從而導(dǎo)致心肌損傷、心功能障礙和（或）心律失常的一種疾病。近年來(lái)，VMC在我國(guó)的發(fā)病率呈逐年上升趨勢(shì)，主要患病人群為青少年和兒童，但其發(fā)病機(jī)制目前尚未完全闡明，在治療方面也沒(méi)有特效療法，仍以休息、對(duì)癥治療、營(yíng)養(yǎng)心肌及抗脂質(zhì)過(guò)氧化損傷主。目前尚未見(jiàn)有關(guān)參蘇飲治療本病的報(bào)道，

2、本實(shí)驗(yàn)意在通過(guò)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究中藥參蘇飲加減對(duì)VMC的治療作用，從而為病毒性心肌炎的治療尋求更多的治療方法，以便有效的指導(dǎo)臨床，為臨床治療提供可靠的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法：選用雄性Balb/C小鼠60只，隨機(jī)分為4組，每組15只：空白對(duì)照組、模型組、利巴韋林組、中藥參蘇飲加減組。其中M、R、S組小鼠分別腹腔注射10-8TCID50/ml CVB3Nancy標(biāo)準(zhǔn)株病毒液0.1ml，N組小鼠腹腔注射0.1ml生理鹽水作為對(duì)照，并于造模后

3、1小時(shí)開(kāi)始治療。根據(jù)人用藥量與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物用藥的換算公式，計(jì)算出小鼠的用藥量：R組灌胃利巴韋林0.2ml/10g（10mg/m），S組灌胃中藥0.2ml/10g（1g/ml），N、M組灌胃生理鹽水0.2ml/10g。每日治療1次，連續(xù)治療10天。治療期間觀察各組小鼠的皮毛、飲食、活動(dòng)、大小便等改變及死亡情況，并于造模前3天、造模當(dāng)日、造模后第3天、第7天、處死前稱重。斷頭處死小鼠，取血離心后分離上清液凍存待測(cè)；剖開(kāi)胸腔，無(wú)菌摘取心臟，取左心

4、室并將其剖開(kāi)分別放入70％乙醇和4％甲醛溶液中，放于4℃冰箱中存放待測(cè)。
　　 結(jié)果：⑴各組小鼠造模前和造模當(dāng)日皮毛光澤，活動(dòng)、飲食、大小便正常，各組體重?zé)o明顯差別（P>0.05）。治療期間注射CVB3的各組小鼠出現(xiàn)活動(dòng)減少、聚堆，飲食量下降，體重減輕，皮毛失去光澤，并出現(xiàn)卷毛現(xiàn)象，模型組有3只小鼠死亡，體重與空白對(duì)照組相比有顯著性差別（P<0.01）；中藥組與利巴韋林組在病毒感染初期各有1只小鼠死亡，之后未再出現(xiàn)死亡，存活小鼠

5、狀態(tài)好于模型組，雖然體重減輕，但中藥組小鼠處死前出現(xiàn)體重緩慢增長(zhǎng)趨勢(shì)，與模型組比較有顯著性差異（P<0.01）。⑵模型組小鼠血清AST、CK水平明顯升高，與空白對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.01）；中藥組與利巴韋林組均能降低小鼠血清中AST、CK水平，與模型組比較有顯著性差異（P<0.01）；中藥組AST、CK水平低于利巴韋林組，且二者比較有差異（AST：P<0.05；CK：P<0.01）。⑶模型組小鼠血清SOD活力明顯降低，與空白對(duì)

6、照組比較有顯著性差異（P<0.01）；中藥組與利巴韋林組均能提高小鼠血清中SOD活力，與模型組比較有顯著性差異（P<0.01）；而中藥組與利巴韋林組比較亦有差異（P<0.05），中藥組SOD活力比利巴韋林組高。⑷模型組小鼠血清NO水平明顯升高，與空白對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.01）；中藥組利與巴韋林組均能升高小鼠血清中NO水平，中藥組與模型組比較有顯著性差異（P<0.01），利巴韋林組與模型組比較也有差異（P<0.05）；中藥組血

7、清中NO量低于利巴韋林組，二者比較亦有顯著性差異（P<0.01）。⑸以熒光指數(shù)（FI）定量分析Caspase-3蛋白的相對(duì)含量，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：模型組小鼠心肌組織中Caspase-3蛋白水平明顯升高（FI>1.0），與空白對(duì)照組比較有顯著性差異（P<0.01）；中藥組與利巴韋林組均能降低小鼠心肌組織中Caspase-3蛋白水平，與模型組比較有顯著性差異（P<0.01）；中藥組心肌組織中Caspase-3含量低于利巴韋林組，二者比較亦有顯著

8、性差異（P<0.05）。⑹空白對(duì)照組小鼠心肌正常，無(wú)明顯病理改變。模型組、利巴韋林組、中藥組小鼠心肌均有不同程度病毒性心肌炎的病理改變。模型組小鼠心肌細(xì)胞混濁腫脹，細(xì)胞橫紋模糊不清，胞漿嗜酸性染色增強(qiáng)，可見(jiàn)多灶性炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和炎性灶周圍大面積心肌細(xì)胞的變性、壞死，胞核碎裂或消失，肌原纖維扭曲、斷裂，間質(zhì)細(xì)胞水腫。中藥組病變明顯減少，僅見(jiàn)少數(shù)以淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主的炎性病灶。利巴韋林組心肌炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和壞死程度比模型組輕，比中藥治療組重。