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1、目的:分析脊柱融合術(shù)患者外周血中骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)基因編碼區(qū)序列,探討B(tài)MP-2基因編碼區(qū)表達(dá)異常存在的可能性,以及與脊柱融合術(shù)后植骨融合的相關(guān)性,尋找影響植骨融合的遺傳學(xué)因素。 方法:從150例行脊柱融合術(shù)患者(70例行頸椎前路自體髂骨椎間植骨融合術(shù),80例行腰椎后路橫突間植骨融合術(shù))及145例正常對(duì)照組的空腹靜脈血中提取DNA,采用聚合酶鏈反應(yīng)一單鏈構(gòu)象
2、多態(tài)性分析(PCR-SSCP)、變性液相高效色譜分析技術(shù)(DHPLC)及DNA測(cè)序技術(shù),檢測(cè)其BMP-2基因編碼區(qū)外顯子1、2及成熟肽基因片段序列的突變和單核苷酸多態(tài)性(SNP),尋找突變率及(或)多態(tài)性位點(diǎn)分布頻率;分別對(duì)頸椎前路自體髂骨植骨融合術(shù)及腰椎后路橫突間植骨融合術(shù)患者進(jìn)行術(shù)后1周、3、6、12個(gè)月的臨床隨訪,采用X射線常規(guī)正側(cè)位及動(dòng)力位片評(píng)價(jià)植骨融合程度;建立數(shù)據(jù)庫(kù),采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件尋找突變率及(或)多態(tài)性位點(diǎn)分布頻率與
3、植骨融合程度的相關(guān)性。 結(jié)果:經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)在所有295例樣本中,共有106例(病例組56例,對(duì)照組50例)樣本的EXON2中第268位堿基處為A/G雜合子;189例(病例組94例,對(duì)照組95例)樣本的EXON2中第268位堿基處為G/G純合子;所有病例組中均未見(jiàn)有GENBANK中報(bào)道的A/A純合子,其外周血中BMP-2的EXON1及成熟肽片段編碼基因沒(méi)有發(fā)現(xiàn)突變位點(diǎn)或多態(tài)性位點(diǎn)。70例頸椎前路自體髂骨植骨組術(shù)后融合程度:快組22例
4、,中組39例,慢組9例,與A/G、G/G兩種基因型的頻率分布有相關(guān)性,且快組中A/G基因型分布頻率明顯高于中組及慢組。80例腰椎后路橫突問(wèn)植骨融合組術(shù)后融合程度:快組20例,中組44例,慢組16例,與A/G、G/G兩種基因型的頻率分布無(wú)相關(guān)性。 結(jié)論:本研究中所選擇脊柱融合術(shù)患者及其健康對(duì)照者外周血中BMP-2基因編碼區(qū)發(fā)現(xiàn)有多態(tài)性位點(diǎn)分布,且其分布頻率與頸椎前路自體髂骨植骨融合程度之間有相關(guān)性;雖然研究發(fā)現(xiàn)其分布頻率與腰椎后路
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