骨形態(tài)發(fā)生蛋白2基因表達(dá)異常與脊柱融合的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：分析脊柱融合術(shù)患者外周血中骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2，BMP-2)基因編碼區(qū)序列，探討B(tài)MP-2基因編碼區(qū)表達(dá)異常存在的可能性，以及與脊柱融合術(shù)后植骨融合的相關(guān)性，尋找影響植骨融合的遺傳學(xué)因素。 方法：從150例行脊柱融合術(shù)患者(70例行頸椎前路自體髂骨椎間植骨融合術(shù)，80例行腰椎后路橫突間植骨融合術(shù))及145例正常對(duì)照組的空腹靜脈血中提取DNA，采用聚合酶鏈反應(yīng)一單鏈構(gòu)象

2、多態(tài)性分析(PCR-SSCP)、變性液相高效色譜分析技術(shù)(DHPLC)及DNA測(cè)序技術(shù)，檢測(cè)其BMP-2基因編碼區(qū)外顯子1、2及成熟肽基因片段序列的突變和單核苷酸多態(tài)性(SNP)，尋找突變率及(或)多態(tài)性位點(diǎn)分布頻率；分別對(duì)頸椎前路自體髂骨植骨融合術(shù)及腰椎后路橫突間植骨融合術(shù)患者進(jìn)行術(shù)后1周、3、6、12個(gè)月的臨床隨訪，采用X射線常規(guī)正側(cè)位及動(dòng)力位片評(píng)價(jià)植骨融合程度；建立數(shù)據(jù)庫(kù)，采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件尋找突變率及(或)多態(tài)性位點(diǎn)分布頻率與

3、植骨融合程度的相關(guān)性。 結(jié)果：經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)在所有295例樣本中，共有106例(病例組56例，對(duì)照組50例)樣本的EXON2中第268位堿基處為A/G雜合子；189例(病例組94例，對(duì)照組95例)樣本的EXON2中第268位堿基處為G/G純合子；所有病例組中均未見(jiàn)有GENBANK中報(bào)道的A/A純合子，其外周血中BMP-2的EXON1及成熟肽片段編碼基因沒(méi)有發(fā)現(xiàn)突變位點(diǎn)或多態(tài)性位點(diǎn)。70例頸椎前路自體髂骨植骨組術(shù)后融合程度：快組22例

4、，中組39例，慢組9例，與A/G、G/G兩種基因型的頻率分布有相關(guān)性，且快組中A/G基因型分布頻率明顯高于中組及慢組。80例腰椎后路橫突問(wèn)植骨融合組術(shù)后融合程度：快組20例，中組44例，慢組16例，與A/G、G/G兩種基因型的頻率分布無(wú)相關(guān)性。 結(jié)論：本研究中所選擇脊柱融合術(shù)患者及其健康對(duì)照者外周血中BMP-2基因編碼區(qū)發(fā)現(xiàn)有多態(tài)性位點(diǎn)分布，且其分布頻率與頸椎前路自體髂骨植骨融合程度之間有相關(guān)性；雖然研究發(fā)現(xiàn)其分布頻率與腰椎后路