(S)-甘油-單亞油酸鹽通過(guò)阻礙NF-кB信號(hào)的激活抑制炎癥基因表達(dá)的研究.pdf

1、目的:研究亞油酸(LA)的衍生物(S)-甘油-單亞油酸鹽(脂肪酸甘油，F(xiàn)AG)通過(guò)阻礙核因子-B(NF-B)信號(hào)的激活，抑制可誘導(dǎo)的一氧化氮合酶(iNOS)依賴性一氧化氮(NO)的形成及炎癥基因表達(dá)的作用。
　　方法: RAW264.7巨噬細(xì)胞經(jīng) FAG處理后，利用 Griess反應(yīng)法檢測(cè)了 NO的產(chǎn)生量,采用蛋白質(zhì)印跡免疫分析法和實(shí)時(shí)定量 RT-PCR及酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)測(cè)定了 iNOS和炎性細(xì)胞因子的mRNA與蛋白質(zhì)表達(dá)水平。另

2、外，為了檢測(cè) FAG對(duì) NF-KB轉(zhuǎn)錄和 IB的磷酸化及降解，利用了蛋白質(zhì)印跡免疫分析法。采用熒光素酶檢測(cè)法和凝膠遷移率實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)了 FAG對(duì) NF-KB信號(hào)激活的影響。
　　結(jié)果:與經(jīng)脂多糖(LPS)刺激的陰性對(duì)照組相比，經(jīng) FAG處理的實(shí)驗(yàn)組 N O產(chǎn)生量明顯減少；iNOS和促炎性細(xì)胞因子白介素(IL)-1K、I L-6的表達(dá)明顯減少；而腫瘤壞死因子(TNF)-KB的表達(dá)無(wú)差異。另外，F(xiàn)AG可以阻礙 IB的磷酸化、泛素化以及 N