轉基因小鼠胰島細胞瘤鑒定及發(fā)病機理的初步研究.pdf

1、胰島細胞瘤是胰腺內(nèi)分泌腫瘤中的一種，臨床上比較少見。由于臨床表現(xiàn)多樣，易出現(xiàn)診斷錯誤。目前關于胰島細胞瘤的早期診斷治療的報道較少，并且關于其發(fā)病機理的分子生物學研究尚未完全清楚。Simian Vires40(SV40)屬于多瘤病毒屬，其早期基因編碼產(chǎn)物大T抗原(SV40Tag)具有致癌性。研究表明，通過注射SV40Tag，可建立起胰腺腫瘤，骨肉瘤，膀胱瘤以及肝癌的倉鼠模型。 本文利用四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)中的Tet-on系統(tǒng)與pTRE-

2、SV40Tag重組質粒共同對FVB小鼠進行精胚胎的雄原核顯微注射，經(jīng)PCR和Southern檢測獲得陽性轉基因小鼠。通過飲水添加Dox進行誘導的雙陽性小鼠在胰腺和腦中檢測到SV40Tag表達，并發(fā)現(xiàn)沒有Dox誘導的雙陽性小鼠胰腺內(nèi)也有SV40Tag表達。百分之六十的雙陽性轉基因小鼠在20周后出現(xiàn)四肢無力，消瘦，腹部腫大等現(xiàn)象。通過血糖測試以及胰島素敏感性測試發(fā)現(xiàn)上述小鼠出現(xiàn)胰島素分泌紊亂癥狀。剖腹觀察見有胰腺腫瘤形成。組織病理學，分子標

3、記和免疫組織化學分析證明該腫瘤為源自胰腺胰島細胞的胰島細胞瘤利用real-time PCR方法與免疫共沉淀等方法對該模型的基因表達變化進行分析，結果顯示，IGF通路有明顯變化，且SV40Tag與IGF通路中的IRS-1能以復合物的形式存在。 綜上，本研究成功建立pTet-on/pTRE-SV40Tag轉基因小鼠胰島細胞瘤模型，并對其發(fā)病機理進行了初步探討。這將對SV40的致瘤機理以及胰島細胞瘤的防御，臨床診斷以及治療提供一定的依