NF-κB調(diào)控氧化LDL激活系膜細(xì)胞TGF-β1轉(zhuǎn)錄的研究.pdf_第1頁(yè)
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1、該文擬從Ox-LDL為刺激物,大鼠腎小球系膜細(xì)胞為研究對(duì)象,觀察NF-κB、TGF-β1的變化,并對(duì)兩者之間可能存在的關(guān)系做進(jìn)一步的檢測(cè),探討脂質(zhì)腎損傷的發(fā)生機(jī)制.第一章,Ox-LDL對(duì)系膜細(xì)胞NF-κB活性的影響.目的:Ox-LDL刺激大鼠腎小球系膜細(xì)胞引起的NF-κB活性變化,以及NF-κB各單體的蛋白表達(dá)水平改變,并確定活化的NF-κB中的二聚體成分.結(jié)論:Ox-LDL隨時(shí)間延長(zhǎng)持續(xù)激活腎小球系膜細(xì)胞的NF-κB的活性,也以濃度依

2、賴的方式誘導(dǎo)NF-κB的活性;Ox-LDL激活的可能是p65、p50組成的異二聚體,與其他單體的關(guān)系可能不大.第二章,Ox-LDL激活系膜細(xì)胞NF-κB信號(hào)傳導(dǎo)通路的研究.目的:IκB結(jié)合NF-κB,使其局限在細(xì)胞漿,抑制其活性,NF-κB的活化需要IκB的降解,檢測(cè)Ox-LDL刺激后的系膜細(xì)胞IκB的蛋白表達(dá)水平和NF-κB活性的變化進(jìn)行觀察,研究Ox-LDL激活系膜細(xì)胞NF-κB可能的信號(hào)傳導(dǎo)通路.結(jié)論:Ox-LDL誘導(dǎo)的系膜細(xì)胞N

3、F-κB的激NF-κB活可能是通過(guò)PKC信號(hào)通路引起的IκB降解而實(shí)現(xiàn)的,但不能排除NF-κB單體蛋白合成增多和轉(zhuǎn)錄因子串話的可能.也不能完全排除PKA通路的參與可能,而ERK和p38MAPK通路介入的可能性不大.第三章,NF-κB對(duì)Ox-LDL誘導(dǎo)TGF-β1轉(zhuǎn)錄調(diào)控的研究.第一節(jié),Ox-LDL對(duì)TGF-β1轉(zhuǎn)錄的影響及TGF-β1啟動(dòng)子分析.目的:通過(guò)對(duì)TGF-β1啟動(dòng)子進(jìn)行系列缺失分析,載入報(bào)告基因質(zhì)粒pGL3-Basic,并以之

4、轉(zhuǎn)染系膜細(xì)胞,了解TGF-β1啟動(dòng)子對(duì)Ox-LDL應(yīng)答的轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)和減弱區(qū)域.結(jié)論:Ox-LDL以時(shí)間和劑量依賴的方式誘導(dǎo)TGF-β1的轉(zhuǎn)錄,在TGF-β1啟動(dòng)子的—1551bp至—845bp與—845bp至—629bp之間可能存在對(duì)Ox-LDL刺激應(yīng)答的轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)序列.第二節(jié),NF-κB誘捕寡核苷酸對(duì)Ox-LDL誘導(dǎo)TGF-β1轉(zhuǎn)錄的影響.目的:觀察NF-κB誘捕寡核苷酸轉(zhuǎn)染系膜細(xì)胞后Ox-LDL誘導(dǎo)的TGF-β1轉(zhuǎn)錄變化,了解NF-κB

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