血竭血清指紋圖譜的研究.pdf

1、血竭（Sanguis Draconis）為棕櫚科植物麒麟竭（Deamonorops draco BL）及同屬他種植物和龍舌蘭科植物劍葉龍血樹（Dracaena Cochinchinensis (Lour.)S.C.Chen）及同屬植物的果實或含樹脂木材的乙醇提取物，植物來源分屬4科5屬的20余種植物，作為傳統(tǒng)中藥使用已有1500多年的歷史。至1971 年開發(fā)成功了國產(chǎn)血竭，為傳統(tǒng)中藥血竭的國產(chǎn)化奠定了基礎。國產(chǎn)血竭與進口血竭化學成分不同

2、，但都具有活血化瘀、消腫止痛、收斂止血的功效，尤其是近年來采用國產(chǎn)血竭治療心腦血管疾病，有較好的療效。 本論文以國產(chǎn)血竭及進口血竭為研究對象，通過對指紋圖譜及血清指紋圖譜的研究，確定其在體外和體內化學成分上的相關性，并與藥理學結果相關聯(lián)，初步形成中藥指紋圖譜、中藥血清指紋圖譜及藥理作用三位一體的統(tǒng)一，為確定一個或若干有效成分作為原藥材及制劑質量控制的目標成分，克服在指紋圖譜質量控制上藥理作用和化學成分的相關性尚存的不足，為建立

3、起一套完整的對中藥質量全面綜合的評估系統(tǒng)提供依據(jù)。 全文由以下三部分組成： （一）緒論 概述血竭的生藥學、化學成分、藥理作用、含量測定方法以及中藥指紋圖譜、中藥血清指紋圖譜的研究現(xiàn)狀。 （二）血竭指紋圖譜的建立 中藥色譜指紋圖譜在控制某些峰已知對應物質（即指標成分）的同時，還可通過對整個峰群的掌握，以全面控制所含物質群。使用島津高效液相色譜儀、Diamonsil C18色譜柱及Easyguard

4、C18保護柱，以乙腈：1％冰醋酸 =38：62為流動相，280nm為檢測波長，流速1.2ml/min，記錄各血竭供試品溶液的HPLC圖譜，運用國家藥典委員會《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)2004A版》軟件進行相似度分析：國產(chǎn)血竭供試品指紋圖譜相似度結果在0.797-0.976之間，與進口血竭（印度尼西亞產(chǎn)）有顯著差異，相似度結果僅為0.268。 （三）含藥血清制備方法的研究 血清中含有的成分才是中藥的體內直接作用物質

5、，為去除血清中固有成分及內源性雜質，高度富集入血成分，實驗通過在空白血中加入廣西“芒果牌”血竭，將其HPLC圖譜中特征峰較為明顯的5個成分的峰面積作為檢測指標（其中2個為龍血素A和龍血素B），以原溶液為對照計算加樣后的提取百分率，確定制備含藥血清的最佳途徑，結果顯示先通過乙腈沉淀血漿蛋白，再使用與血樣同等量的乙酸乙酯提取三次，可使血竭中5個特征性成分的提取率達到80％以上。 （四）血清指紋圖譜的建立 在上述研究得到的實驗

6、條件基礎上，測定各血竭供試品的血清HPLC圖譜，原藥材中11個共有峰（除印尼血竭不含9號峰——龍血素B，其血清中亦無）中有5個均在血清中有不同程度的表達，相對保留時間吻合，生成國產(chǎn)血竭血清對照指紋圖譜后與各血清指紋圖譜匹配色譜峰進行相似度分析，“芒果牌”、“版納牌”、“柬龍牌”血竭的相似度值較為接近，分別為0.825、0.845、0.932，“龍王牌”和進口血竭（印度尼西亞產(chǎn)）分別為0.625、0.605，后兩種血竭與對照指紋圖譜差異較