兒童耐甲氧西林金黃色葡萄球菌感染臨床及分子學特征研究.pdf

1、目的：了解上海地區(qū)兒童耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)感染臨床及分子學特征;同時探討臨床分離的MRSA對抗菌藥物耐藥情況與耐藥基因攜帶情況的關系。
　　方法：采用隊列研究方法，對復旦大學附屬兒科醫(yī)院2009年3月至2011年11月MRSA感染住院患兒的臨床特征進行分析;采用紙片瓊脂擴散法藥敏試驗檢測MRSA對常用抗菌藥物的耐藥性;采用聚合酶鏈式反應(PCR)檢測β內酰胺類抗生素耐藥基因mecA、大環(huán)內酯類抗生素耐藥基因ermB

2、、氨基糖苷類抗生素耐藥相關基因[aac(6')/aph(2")、aph(3')Ⅲ、ant(4'，4")]、耐消毒劑基因qacA在MRSA菌株的攜帶率，并檢測殺白細胞素(PVL)基因在MRSA菌株的陽性率;多重PCR法檢測MRSA SCCmec分型。
　　結果：(1)37株MRSA中，56.80％(21株)來源于醫(yī)院(HA-MRSA)，43.20％(16株)來源于社區(qū)(CA-MRSA)。MRSA感染以呼吸道感染最常見，分布以重癥監(jiān)護

3、病房最多。CA-MRSA感染可引起皮膚軟組織感染、化膿性扁桃體炎等，嚴重者亦可引起肺炎、敗血癥等，而HA-MRSA感染更具侵襲性，其多引起肺炎、敗血癥，亦可引起腦膜炎。HA-MRSA與CA-MRSA感染所致發(fā)熱患兒中，HA-MRSA感染者表現(xiàn)出更長的熱程（10.50天）。炎癥指標方面，HA MRSA感染患兒C反應蛋白(63.00mg/L)較CA-MRSA(9.50 mg/L)高，其差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.015)，而兩者的外周血白細

4、胞計數(shù)、降鈣素原差異無統(tǒng)計學意義。
　　(2)37株MRSA中，SCCmec分型以SCCmecⅢ型最多見，共17株(45.95％)，其次是SCCmecⅣ型8株(21.62％)，SCCmecⅡ型1株(2.70％)，未分型11株(29.73％)，未發(fā)現(xiàn)SCCmecⅠ、Ⅴ型。其中，在21株HA-MRSA中，SCCmecⅢ型最多見，為15株(71.42％)，SCCmecⅣ型1株(4.76％)，未分型者5株(23.82％);在16株CA-M

5、RSA中，SCCmecⅣ型最多見，為7株(43.75％)，Ⅲ型2株(12.50％)，Ⅱ型1株(6.25％)，未分型者6株(37.50％)。37株MRSA菌株PVL基因檢出率為75.70％，在HA-MRSA中為80.95％，在CA-MRSA中為68.75％，兩者差異無統(tǒng)計學意義(P=0.458)。
　　(3)37株MRSA對青霉素、優(yōu)立新、頭孢唑啉、頭孢呋辛耐藥率均為100％;對慶大霉素、紅霉素、克林霉素、復方磺胺類、磷霉素、利福平

6、、左氧氟沙星耐藥率分別為51.35％(19/37)、81.08％(30/37)、51.35％(19/37)、16.22％(6/37)、27.03％(10/37)、37.84％(14/23)、54.05％(20/37);而對壁霉素、萬古霉素、利奈唑胺的耐藥率均為0.00％。其中，16株CA-MRSA對慶大霉素、紅霉素、克林霉素、復方磺胺類、磷霉素、利福平、左氧氟沙星耐藥率分別為12.50％、75.00％、62.50％、12.50％、12.

7、50％、6.25％、31.25％;21株HA-MRSA對慶大霉素、紅霉素、克林霉素、復方磺胺類、磷霉素、利福平、左氧氟沙星耐藥率分別為80.95％，85.71％，42.86％，19.05％，38.10％，61.90％，71.43％;通過統(tǒng)計學檢驗，對于慶大霉素、左氧氟沙星以及利福平的耐藥性，HA-MRSA明顯高于CA-MRSA，其差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.000、0.015、0.001)。
　　(4)37株MRSA菌株中，β內酰

8、胺類抗生素耐藥基因mecA基因陽性37株(100％)，大環(huán)內酯類抗生素耐藥基因ermB陽性9株(24.30％)，氨基糖苷類抗生素耐藥基因aac(6')/aph(2")陽性21株(56.80％)，aph(3')-Ⅲ陽性10株(27.00％)，ant(4'，4")陽性6株(16.20％)，耐消毒劑基因qacA陽性9株(24.30％)。其中，在16株CA-MRSA中，ermB、aac(6')/aph(2")、aph(3')-Ⅲ、ant(4'，

9、4")、QacA的檢出率分別為25.00％、18.75％、31.25％，25.00％，25.00％;在21株HA-MRSA中，ermB、aac(6')/aph(2")、aph(3')-Ⅲ、ant(4'，4")、QacA的檢出率分別為23.81％、85.71％、23.81％、9.52％、23.81％;通過統(tǒng)計學檢驗，對于aac(6')/aph(2")的檢出率，HA-MRSA明顯高于CA-MRSA，其差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.000)。在

10、氨基糖苷類耐藥基因中，最常見基因組合為aac(6')/aph(2")與aph(3')-Ⅲ基因，共6株(16.20％)，其次是aac(6')/aph(2")與ant(4'，4")基因，共2株(5.40％)，aph(3')-Ⅲ與ant(4'，4")基因共1株(2.70％)，而aac(6')/aph(2")、aph(3')-Ⅲ、ant(4'，4")均攜帶株1株(2.70％)。
　　(5)通過對MRSA臨床耐藥情況與耐藥基因攜帶情況的對比

11、分析可知，ermB基因攜帶株對紅霉素的耐藥率并沒有明顯高于未攜帶株，其差異無統(tǒng)計學意義(P=0.160); aac(6')/aph(2")基因攜帶株對慶大霉素的耐藥率明顯高于未攜帶株，其差異具有統(tǒng)計學意義(P=0.000)，而aph(3')-Ⅲ基因及ant(4'，4")基因的攜帶株對慶大霉素的耐藥率并沒有比未攜帶株更高，其差異無統(tǒng)計學意義(P=0.920、0.405)。
　　結論：HA-MRSA與CA-MRSA相比，其感染更具侵襲