G蛋白偶聯(lián)受體GPR30介導了雌激素和Tamoxifen誘導的子宮內(nèi)膜癌細胞的增殖和侵襲.pdf

1、他莫昔芬(Tamoxifen)作為一種選擇性雌激素受體在臨床上調(diào)節(jié)劑被廣泛的應用于激素敏感型乳腺癌患者的抗激素治療。在乳腺癌患者中,Tamoxifen能顯著的降低雌激素敏感乳腺癌的復發(fā)和擴散。然而,長期的Tamoxifen治療會增加患者發(fā)生子宮內(nèi)膜癌的風險。G蛋白偶聯(lián)受體30(GPR30)是一種雌激素膜受體,已有的研究表明GPR30可以被雌激素和Tamoxifen激活,通過下游MAPK等信號通路的快速激活對基因表達和細胞功能進行調(diào)節(jié)。本

2、研究的目的是探究GPR30在Tamoxifen導致的子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的過程中的作用。研究分以下四個部分進行。
　　第一部分 GPR30對雌激素和Tamoxifen誘導的子宮內(nèi)膜癌細胞增殖侵襲功能的影響
　　濃度梯度實驗發(fā)現(xiàn)10-7M E2、10-7M OHT和10-8G1對ISHKAWA和KLE細胞具有較強的增殖促進作用,時間梯度實驗發(fā)現(xiàn)在6天內(nèi)三種藥物對細胞的增殖促進作用呈現(xiàn)時間依賴趨勢;通過于擾質(zhì)粒穩(wěn)定轉染,ISHIKAW

3、A和KLE細胞中的GPR30被明顯下調(diào);GPR30下調(diào)后ISHIKAWA和KLE細胞在E2、OHT和G1作用下的增殖、遷移和侵襲能力得到明顯抑制;在加用了GPR30的特異性抑制劑G15后,E2、OHT和G1誘導的ISHIKAWA和KLE細胞的增殖和侵襲得到明顯抑制。
　　結論:E2、OHT和G1能夠促進子宮內(nèi)膜癌細胞的增殖和侵襲能力,GPR30的表達下調(diào)和激活阻滯制能夠抑制E2、OHT和G1誘導的子宮內(nèi)膜癌細胞增殖和侵襲活性。

4、r>　　第二部分GPR30下游通路MAPK通路對雌激素和Tamoxifen作用下子宮內(nèi)膜癌細胞增殖和侵襲能力的影響
　　E2、OHT和G1在ISHKAWA和KLE細胞中顯著上調(diào)了MAPK通路蛋白ERK1/2的磷酸化水平;ERK1/2阻滯劑U0126抑制了E2、OHT和G1對ISHIKAWA和KLE細胞的增殖和侵襲能力的促進作用。
　　結論:GPR30下游MAPK通路參與了E2、OHT和G1對子宮內(nèi)膜癌細胞增殖和侵襲功能調(diào)節(jié)。

5、
　　第三部分GPR30對子宮內(nèi)膜癌相關基因PAX2表達的調(diào)節(jié)
　　在ISHKAWA和KLE細胞中,E2、OHT和G1上調(diào)了PAX2的RNA表達,而加用了U0126、G15后,PAX2的上調(diào)被阻滯;GPR30穩(wěn)定下調(diào)后,E2、OHT和G2對PAX2的上調(diào)亦被阻滯。
　　結論:E2、OHT和G1在子宮內(nèi)膜癌細胞中GPR30依賴的促進了PAX2的表達。
　　第四部分 GPR30和PAX2在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達及相關

6、性
　　免疫組織化學檢測發(fā)現(xiàn)正常子宮內(nèi)膜(15例)、不典型增生子宮內(nèi)膜(13例)和子宮內(nèi)膜癌(37例)之間,GPR30的陽性表達率無明顯差異(p=0.125),強陽性表達率具有明顯差異(p＜0.001),PAX2的陽性表達率具有明顯差異(p＜0.05)。子宮內(nèi)膜癌中PAX2和GPR30的高表達與腫瘤的分期、分化肌層浸潤深度、淋巴結轉移等無明顯相關性(p＞0.05)。在子宮內(nèi)膜癌中GPR30的高表達與PAX2的高表達具有明顯相關性(