原發(fā)性免疫性血小板減少癥患者外周血Treg細(xì)胞miRNA基因表達(dá)譜分析及大劑量地塞米松沖擊治療臨床療效的觀察.pdf

1、第一部分，原發(fā)性免疫性血小板減少癥患者外周血調(diào)節(jié)性T細(xì)胞中miRNA基因表達(dá)譜的分析及驗(yàn)證
　　目的：前期研究證實(shí)CD4+CD25+ Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）參與了原發(fā)性免疫性血小板減少癥（primary immune thrombocytopenia, ITP）的免疫發(fā)病機(jī)制。本研究通過(guò)分析ITP患者Treg細(xì)胞中miRNA基因表達(dá)譜，探討miRNA是否參與了ITP中Treg的免疫調(diào)控。
　　方法：選取蘇州大學(xué)

2、附屬第三醫(yī)院常州市第一人民醫(yī)院收治的初診ITP患者21例及正常對(duì)照者18例，應(yīng)用免疫磁珠分選技術(shù)分選出ITP患者及正常對(duì)照者外周血Treg細(xì)胞；提取Treg中總RNA，應(yīng)用miRBase18.0數(shù)據(jù)庫(kù)的芯片探針微陣列芯片技術(shù)及Volcano Plot filtering軟件分析ITP患者及對(duì)照者Treg細(xì)胞中miRNA表達(dá)譜；篩選出兩組Treg細(xì)胞中存在差異性表達(dá)的miRNA；應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證差異性表達(dá)的相關(guān)miRN

3、A。
　　結(jié)果：ITP患者與正常對(duì)照組Treg細(xì)胞內(nèi)存在差異表達(dá)的miRNA共502個(gè)，其中244個(gè)表達(dá)水平上調(diào)，258個(gè)表達(dá)水平下調(diào)；選擇表達(dá)下調(diào)的miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p；應(yīng)用熒光實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)進(jìn)一步驗(yàn)證，ITP患者組Treg細(xì)胞中miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p基因表達(dá)水平均顯著低于正常對(duì)照組，結(jié)果有顯著性差異(P<0.03；P<0.01；P<0

4、.02)；miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p之間表達(dá)水平無(wú)明顯相關(guān)性。
　　結(jié)論：與正常對(duì)照者比較，ITP患者外周血Treg細(xì)胞內(nèi)miRNA基因存在差異性表達(dá)；其中miR-155-5p、miR-146b-5p、miR-142-3p基因表達(dá)水平顯著性下降，提示miRNA可能參與了ITP患者中Treg細(xì)胞的免疫調(diào)控，可能與ITP免疫發(fā)病機(jī)制存在一定的相關(guān)性。
　　第二部分，大劑量地塞米松沖擊治療原

5、發(fā)性免疫性血小板減少癥患者的臨床療效
　　目的：觀察大劑量地塞米松（HD-DXM）沖擊治療ITP患者短期臨床療效。
　　方法：我院收治的81例ITP患者，初診69例，分為兩組：A組36例，予HD-DXM40mg?d-1靜滴4天，連用4天為一療程；B組33例，口服常規(guī)劑量潑尼松1mg?kg-1?d-1，連用4周后作為對(duì)照。A組HD-DXM一療程結(jié)束后，治療有效的32例患者分為2個(gè)亞組，A1組17例，予以小劑量潑尼松10mg?d

6、-1維持治療；A2組15例，不接受維持治療。復(fù)治患者12例（C組），予HD-DXM一療程治療后行脾切除手術(shù)；
　　結(jié)果：治療后第5天，A組血小板的中位數(shù)顯著高于B組（79×109/L vs.47×109/L， P<0.01）。治療后第14天，A1組血小板上升患者的比例顯著高于A2組（58.8% vs.33.3%, P<0.05），C組患者順利完成腹腔鏡脾臟切除術(shù)。
　　結(jié)論：HD-DXM治療初診ITP患者短期療效明顯優(yōu)于潑尼