Med19基因在骨肉瘤中的功能研究及其臨床意義.pdf

1、上海交通大學碩士學位論文8第一部分第一部分Med19基因在骨肉瘤組織中的表達及臨床意義基因在骨肉瘤組織中的表達及臨床意義1緒論1緒論骨肉瘤(osteosarcoma)是一種起源于間葉組織的惡性腫瘤，是青少年最常見的骨原發(fā)惡性腫瘤[12]。好發(fā)于長骨干骺端，最多見于膝關節(jié)周圍，75％病例在1020歲之間發(fā)病，少數(shù)見于10歲以前及30歲以后。1970年以前標準治療是截肢術(shù)，大部分患者在兩年內(nèi)死于肺轉(zhuǎn)移，5年生存率僅為10％20％。上世紀70

2、年代末和80年代初，形成新輔助化療的概念，即：術(shù)前應用化療消滅微轉(zhuǎn)移灶，同時控制腫瘤原發(fā)病灶，根據(jù)化療反應調(diào)整術(shù)后化療方案，骨肉瘤5年總生存率已達60％以上[3]。我國目前未行術(shù)前化療者復發(fā)率在30％左右，應用術(shù)前化療后60％70％患者得以保肢。一些研究還表明，新輔助化療聯(lián)合保肢手術(shù)治療后的患者，其5年生存率可達70％[45]。因此，骨肉瘤化療現(xiàn)在正處在一個新的階段，必須尋找在基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學新的突破口才能取得進一步發(fā)展。尋找骨肉瘤標

3、志物以判斷其生物學特性和預后為眾多學者所關注，大量研究表明患者的發(fā)病年齡、腫瘤部位、腫瘤大小、起病到就診的時間，分期、病理類型、血清乳酸脫氫酶（lactatedehydrogenaseLDH）和堿性磷酸酶（alkalinephosphataseALP）水平、化療后壞死率、手術(shù)方式等[6]與骨肉瘤預后密切相關。隨著腫瘤分子生物學研究的進展，逐漸認識到骨肉瘤某些重要基因、蛋白的表達不但影響骨肉瘤的發(fā)生、發(fā)展[7]，還與骨肉瘤的治療療效有關。

4、Med19基因位于染色體的11q12.1位置，編碼一種與酵母中促進轉(zhuǎn)錄的Mediat19（Med19）同源的蛋白。中介因子復合體（Mediat）最早在酵母中發(fā)現(xiàn)，由25個亞基組成的復合體，它可以與RNA聚合酶II結(jié)合，促進或抑制mRNA的合成，結(jié)構(gòu)的上分為頭部、中部和尾部三個部分，其中頭部和尾部對Mediat的活性起決定作用[89]。最近的研究表明哺乳動物和酵母的Mediat在亞基組成、結(jié)構(gòu)、功能等方面有非常強的保守性[10]。中介因子

5、復合體（Mediat）可以與RNA聚合酶II結(jié)合，促進或抑制mRNA的合成在真核細胞mRNA合成的活化和阻抑中起著關鍵作用包括促進激活的轉(zhuǎn)錄、增強基礎轉(zhuǎn)錄和增強羧基端結(jié)構(gòu)域（CTD）的磷酸化。大量研究表明Mediat各個亞基參與介導多種信號途徑(圖1)，例如上海交通大學碩士學位論文10大細胞癌系中克隆到的人類新基因，在非小細胞肺癌中高表達并與臨床分期顯著相關。利用GenBank的UniGene數(shù)據(jù)庫對LCMR1進行電子表達譜分析，結(jié)果表

6、明該基因在多種腫瘤及正常組織中都有分布，例如：類癌、精細胞癌、肺泡巨噬細胞、肺上皮細胞、胰島細胞癌、乳腺、心臟等[20]?；蛐酒Y(jié)果分析，LCMR1并非作用于某種轉(zhuǎn)移的信號通路，可直接或間接參與和介導了多種信號途徑[21]。近期李金東等[22]利用RNAi技術(shù)沉默肺癌細胞中Medl9基因，可誘導腫瘤細胞凋亡，抑制腫瘤細胞生長。丁相福等[23]應用shRNA慢病毒載體感染MGC803細胞后細胞增殖能力顯著降低、細胞克隆形成能力明顯減弱，

7、細胞周期阻滯于G1期，提示Medl9在腫瘤形成過程中具有重要作用。Li等[24]發(fā)現(xiàn)乳腺癌組織高表達Med19并與腫瘤分級顯著相關，證明Med19在人類乳腺癌細胞增殖中起著重要作用。本實驗通過免疫組織化學方法檢測骨肉瘤患者組織中Med19蛋白的表達情況，探討其與骨肉瘤患者臨床病理特征及預后的相關性，為進一步尋找更特異合理的骨肉瘤預后指標提供線索，為指導臨床診治提供論依據(jù)。2材料與方法材料與方法2.1實驗材料2.1.1病例來源收集、整理2

8、0032007年收住上海六院的有完整病例、病理資料的肢體骨肉瘤患者資料，選擇其中經(jīng)過術(shù)前化療手術(shù)術(shù)后化療其他治療的規(guī)范化綜合治療的患者作為本試驗的研究對象。2.1.2腫瘤組織來源收集、整理上述患者在我院病理科存檔的病理報告、HE切片及蠟塊50例，收集據(jù)骨肉瘤切緣5cm的正常骨組織15例作為平行對照。核對原病理報告、HE切片及蠟塊，選擇含骨肉瘤細胞豐富HE切片對應之蠟塊為試驗標本，將上述50例骨肉瘤組織蠟塊及15例瘤旁正常骨組織蠟塊連續(xù)切