GLP-1R、PKA在糖尿病骨質疏松大鼠腎組織中表達.pdf

1、目的:當今世界，隨著經(jīng)濟的高速發(fā)展和工業(yè)化進程的加速，人類健康面臨非傳染性疾病的威脅正日益增加，糖尿病患病率和糖尿病患者數(shù)量急劇上升。腸促胰素是人體內一種腸源性激素，在進食后，該類激素的釋放可促進胰島素分泌，發(fā)揮葡萄糖濃度依賴性降糖作用，從而為人類治療糖尿病提供了嶄新的思路。GLP-1（Glacogon-likePeptide-1，胰高血糖素樣肽-1）作為腸促胰素的一種，其胰腺效應及其他生物學效應逐漸引起人們的注意。GLP-1受體表達于

2、胰腺，腸，中樞神經(jīng)系統(tǒng)，肺，腎臟和心臟等組織。GLP-1可發(fā)揮降脂、降壓作用，從而對心血管系統(tǒng)產(chǎn)生保護作用;作用于中樞增強學習和記憶功能，保護神經(jīng);通過抗腎組織纖維化、減少氧化應激、降低尿蛋白等對腎臟組織起保護作用;抑制骨吸收，保護骨骼等。眾多的受體與受體后傳導途徑及效應器組成一個極為復雜的信號轉導網(wǎng)絡，在此網(wǎng)絡中，任一部分的變化都可能影響到整個系統(tǒng)，從而引起相應生物學效應的變化，許多因素可以通過不同的機制影響細胞的受體數(shù)目和（或）受體

3、對配體的親和力，受體水平的變化與人生理狀態(tài)及疾病具有一定相關性。目前尚無糖尿病合并骨質疏松動物模型腎組織GLP-1R（Glacogon-likePeptide-1Receptor，胰高血糖素樣肽-1受體）、PKA(ProteinKinaseA，PKA，cAMP依賴蛋白激酶，簡稱激酶A)表達情況的報道，本研究旨在為研究糖尿病、骨質疏松、糖尿病腎病及糖尿病骨質疏松的發(fā)病機制及治療提供實驗依據(jù)和理論基礎，探討GLP-1R、PKA在糖尿病合并骨

4、質疏松大鼠腎組織的表達情況。
　　 方法:100只健康雌性Wistar大鼠(2.5-3月齡)經(jīng)喂養(yǎng)1周后隨機分成正常對照組（假手術組，NC組，N=24），單純去卵巢組(NOVX組，N=26)，糖尿病對照組（糖尿病假手術組，DC組，N=24），糖尿病去卵巢組(DOVX組，N=26)。各組間大鼠體重差異無統(tǒng)計學意義。小劑量STZ腹腔注射法聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)制作糖尿病大鼠模型;雙側卵巢切除法制作骨質疏松大鼠模型。術后4周、8周、12周于

5、各組內隨機取4只大鼠，經(jīng)麻醉處死后分離腎臟，快速腎組織取材，蠟塊包埋，采用免疫組織化學方法檢測NC組、NOVX組、DC組、DOVX組腎組織中GLP-1R、PKA水平的表達。處理實驗數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計學軟件，實驗數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差（(x)±S）表示，各組數(shù)據(jù)符合正態(tài)性分布，組間比較采用單因素方差分析(one-wayANOVA)S-N-K法和Dunnett'sT3法，以P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義。
　　 結果:<

6、br>　　 1、各組腎組織HE染色
　　 NC組及NOVX組大鼠腎組織腎小球結構清晰，血管袢薄而清晰，內皮細胞和系膜細胞數(shù)正常，腎小管正常;DC組及DOVX組腎臟腎小球毛細血管內可見嗜酸性物質增多，內皮細胞和系膜細胞數(shù)量增加，腎小管基膜增厚。
　　 2、各組腎組織GLP-1R表達
　　 GLP-1R表達于腎小管上皮細胞的胞膜和胞漿。去卵巢后4周、8周、12周，NOVX組、DOVX組表達均低于相應對照組，4周、8

7、周NOVX組與NC組比有統(tǒng)計學差異。DC、DOVX組大鼠腎組織GLP-1R水平隨時間變化表達下降。
　　 3、各組腎組織PKA表達
　　 PKA表達于腎小管上皮細胞的胞漿。去卵巢后4周，NC組表達明顯低于NOVX組、DC組、DOVX組;去卵巢后8周，DOVX組明顯低于NC組;去卵巢后12周，NC組明顯低于DC組。
　　 結論:
　　 1、DC、DOVX組腎組織GLP-1R水平隨時間變化表達下降，可能與糖尿