斑蝥酸鈉維生素B6注射液誘導人骨肉瘤細胞MG-63凋亡及其機制的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文斑蝥酸鈉維生素B6注射液誘導人骨肉瘤細胞MG63凋亡及其機制的研究姓名：康肖申請學位級別：碩士專業(yè)：外科學指導教師：扈文海20090301中文摘要胞，用體積分數為25％戊二醛4。C固定，用10g／L鋨酸后固定，丙酮系列脫水，最后用Epon812環(huán)氧樹脂包埋，超薄切片機切片，醋酸鈾與檸檬酸鉛雙重染色，電鏡下觀察細胞超微結構并拍照。5反轉錄聚合酶鏈反應(RTPCR)檢測SurvivinmRNA的表達：實驗組和對照組細

2、胞進行培養(yǎng)，收集細胞，提取細胞總RNA。采用一步法進行反轉錄和擴增。將RTPCR產物用15％瓊脂糖凝膠電泳后，應用凝膠成像系統(tǒng)及凝膠分析軟件對電泳條帶進行成像分析，用Survivin吸光度與13actin吸光度的比值代表Survivin的相對含量。結果：l用不同濃度的斑蝥酸鈉維生素B6注射液作用于MG63細胞后結果顯示斑蝥酸鈉維生素B6注射液能明顯抑制細胞的增殖，并呈劑量和時間依賴性。抑制率最高可達到(685652l、)％。2倒置顯微鏡

3、下觀察對照組細胞呈貼壁生長，生長狀態(tài)良好，細胞透明，呈長梭形，顆粒較少，細胞間界限清楚，細胞核隱約可見。經斑蝥酸鈉維生素B6注射液處理組細胞，隨斑蝥酸鈉維生素B6注射液濃度的增加和作用時間的延長，細胞逐漸變圓，呈漂浮狀態(tài)生長的細胞數量明顯增加，細胞內部結構受到破壞，存活細胞顯著減少，至5099／ml時大部分細胞裂解，可見多量細胞碎片。透視電鏡觀察可見典型的細胞凋亡形態(tài)改變：細胞皺縮，胞膜結構保持完整，胞核固縮，核碎裂，染色質濃縮邊集，形